miR-181a通过靶向SREBP2抑制胆固醇合成通路抑制葡萄膜黑色素瘤转移的机制研究

本研究针对葡萄膜黑色素瘤(UM)转移缺乏有效疗法的难题，通过体内外实验揭示了miR-181a通过靶向SREBP2抑制胆固醇生物合成，进而阻断上皮-间质转化(EMT)和癌症干细胞(CSC)特性的分子机制。研究人员发现miR-181a与crizotinib联用可显著抑制UM转移，为临床治疗提供了新型联合治疗策略。

　　

葡萄膜黑色素瘤(UM)作为成人最常见的原发性眼内恶性肿瘤，其致命威胁主要来自高达50%的转移率。尽管现有疗法能有效控制原发灶，但转移性UM患者的中位生存期不足1年，临床亟需突破性治疗策略。近年来，胆固醇代谢重编程与肿瘤转移的关联引发关注，但具体机制在UM中仍是未解之谜。

蒙特利尔大学（Université de Montréal）和CHU Sainte-Justine研究中心的研究团队在《Journal of Experimental》发表重要成果，首次揭示microRNA miR-181a通过调控胆固醇代谢关键转录因子SREBP2，有效抑制UM转移的分子机制。研究人员采用多组学方法结合功能实验，证实miR-181a-SREBP2-胆固醇代谢轴在UM转移中的核心作用，并创新性地提出与c-Met抑制剂crizotinib的联合治疗方案。

关键技术方法包括：1）利用四种UM细胞系（OMM2.5、UM001等）进行划痕愈合和Transwell侵袭实验；2）建立NSG小鼠脉络膜上注射转移模型；3）RNA测序和生物信息学分析筛选差异基因；4）双荧光素酶报告基因验证miR-181a与SREBP2的靶向关系；5）胆固醇含量测定和肿瘤干细胞球形成实验。

【miR-181a限制UM转移】
通过划痕实验发现miR-181a使UM细胞迁移能力下降47-63%（图1A），Transwell显示侵袭细胞数减少68%（图1B）。小鼠模型中，miR-181a治疗组转移灶生物发光信号降低85%（图1D-G），肝脏转移结节数减少4倍（图1H）。

【抑制EMT和CSC特性】
miR-181a上调上皮标志物E-cadherin（CDH1）2.1倍，下调间质标志物N-cadherin（CDH2）54%（图2A-B）。肿瘤干细胞球形成实验显示，miR-181a使干细胞球直径缩小62%（图2F-G），ALDH⁺细胞比例下降3.5倍（图2H）。

【调控胆固醇生物合成】
RNA-seq发现miR-181a显著抑制胆固醇合成通路（图3C），qPCR验证HMGCR、SQLE等16个合成酶基因下调（图3D）。胆固醇测定显示UM细胞胆固醇水平降低41%（图3G），小鼠原发灶和转移灶胆固醇含量分别下降39%和52%（图3J）。

【SREBP2的核心作用】
生物信息学预测结合双荧光素酶实验证实miR-181a直接靶向SREBP2 3'UTR（图6B）。过表达SREBP2可逆转miR-181a对迁移、侵袭的抑制作用（图6F-I），TCGA数据分析显示SREBP2高表达患者无转移生存期缩短58%（图5E）。

【联合治疗突破】
miR-181a与crizotinib联用使细胞迁移抑制率达91%（图7A-B），小鼠模型肝脏转移完全消失（图7K）。机制上，二者协同阻断c-Met/PI3K/AKT和SREBP2通路（图8）。

这项研究首次阐明胆固醇代谢重编程在UM转移中的关键作用，提出miR-181a通过"SREBP2-胆固醇-EMT/CSC"轴抑制转移的创新机制。临床意义在于：1）发现SREBP2可作为UM预后标志物；2）验证miR-181a的转移抑制作用；3）开创性提出联合靶向代谢和生长因子通路的治疗策略。该成果为转移性UM治疗提供了双重靶点，相关分子机制也可能适用于其他恶性肿瘤的转移干预。