稳定表达Caspase-3荧光传感器（ZipGFP-Casp3）的细胞模型构建及其在干细胞与肿瘤凋亡研究中的应用

研究人员通过构建慢病毒载体，将商业化的Caspase-3荧光传感器ZipGFP-Casp3导入肝/胎盘间充质干细胞（MSCs）、皮肤成纤维细胞及CD133敲除的结直肠癌HT-29/Caco2细胞系，成功建立稳定监测凋亡的细胞模型。实验证实该模型能灵敏响应staurosporine和TRAIL诱导的凋亡，为干细胞及肿瘤干细胞群凋亡机制研究提供了新工具。

　　

科研团队巧妙设计慢病毒载体，将可检测凋亡关键酶活性的商业化荧光探针ZipGFP-Casp3导入多种细胞：包括肝脏和胎盘来源的间充质干细胞(MSCs)、皮肤成纤维细胞，以及经过基因编辑敲除癌症干细胞标志物CD133的结直肠癌细胞系HT-29和Caco2（同时保留野生型对照）。通过流式分选获得稳定表达传感器的细胞后，有趣地发现部分培养物中自发出现持续发绿色荧光的凋亡细胞。

重点测试了转导成功的胎盘MSCs、CD133敲除的HT-29细胞及其对照细胞对经典凋亡诱导剂staurosporine和TRAIL的敏感性。这些闪烁着绿色荧光信号的细胞模型，如同微型生物报警器，成功捕捉到凋亡过程的动态变化。研究不仅证实CD133缺失影响肿瘤干细胞凋亡应答，更建立了适用于干细胞研究和癌症干细胞群体凋亡监测的标准化工具平台。