miR-338-3p通过靶向SOX4调控肝癌干细胞特性及仑伐替尼耐药性的机制研究

本研究针对肝癌干细胞(CSCs)自我更新及仑伐替尼(Lenvatinib)耐药机制这一临床难题，揭示了miR-338-3p/SOX4轴的关键调控作用。上海交通大学医学院附属同仁医院团队通过临床样本分析、体外球体形成实验和体内异种移植模型，证实miR-338-3p可通过抑制SOX4表达削弱肝癌干细胞特性，并增强仑伐替尼敏感性。该发现为肝癌靶向治疗提供了新型生物标志物和潜在干预靶点，对改善晚期肝癌患者预后具有重要临床意义。

　　

肝癌作为全球第六大癌症死因，其治疗面临两大核心挑战：肝癌干细胞(CSCs)驱动的肿瘤复发转移，以及靶向药物仑伐替尼的获得性耐药。上海交通大学医学院附属同仁医院的研究团队在《Scientific Reports》发表的重要研究，揭示了微小RNA miR-338-3p通过调控转录因子SOX4影响肝癌恶性进程的双重机制。

研究团队采用多学科技术手段展开攻关：收集35例接受仑伐替尼治疗的肝癌患者组织样本进行临床相关性分析；通过流式分选CD133⁺/CD90⁺干细胞亚群和球体培养富集CSCs；建立稳定过表达/敲除细胞系进行功能验证；采用双荧光素酶报告基因系统确认miR-338-3p与SOX4的靶向关系；通过极限稀释分析(LDA)在NOD-SCID小鼠模型中评估肿瘤起始能力；利用长期药物诱导建立三种仑伐替尼耐药细胞系。

miR-338-3p在肝癌干细胞中的表达特征
临床样本分析显示miR-338-3p与干细胞标志物CD133/R²=0.608)、CD90(R²=0.4736)呈显著负相关。流式分选的CD133⁺/CD90⁺细胞及连续传代的肿瘤球中miR-338-3p表达显著降低，提示其与干细胞特性呈负相关。

miR-338-3p对干细胞特性的调控作用
过表达miR-338-3p使Huh7和Hep3B细胞的CD133/CD90表达降低50%以上，球体形成能力减弱，体内外LDA显示肿瘤起始细胞频率下降10倍。相反，敲除miR-338-3p使干细胞标志物表达增加2-3倍，小鼠成瘤率提高40%。

SOX4作为关键作用靶点
生物信息学预测和双荧光素酶实验证实SOX4 3'UTR存在miR-338-3p结合位点。突变结合位点后，miR-338-3p对荧光素酶活性的抑制效应消失。临床样本中SOX4与miR-338-3p呈显著负相关(R²=0.532)。功能回复实验表明，SOX4 siRNA可逆转miR-338-3p敲除引起的干细胞特性增强。

仑伐替尼敏感性调控
耐药细胞系中miR-338-3p表达降低60%，过表达miR-338-3p使细胞凋亡率增加3倍。生存分析显示miR-338-3p高表达患者中位生存期延长5.2个月。SOX4过表达可抵消miR-338-3p的增敏作用，证实该通路参与耐药调控。

这项研究首次阐明miR-338-3p/SOX4轴在肝癌干细胞维持和药物耐药中的核心作用，为联合靶向CSCs和逆转耐药的精准治疗策略提供了理论依据。特别值得注意的是，miR-338-3p表达水平可预测仑伐替尼疗效，具有重要转化医学价值。未来研究需探索miR-338-3p递送系统与SOX4抑制剂的联合应用潜力。