综述：推动新方法学（NAMs）在监管毒理学中的应用：通过统一验证与接受框架实现突破

这篇综述系统分析了从传统动物实验向人类相关新方法学（NAMs）转型的挑战与机遇，提出基于标准化协议、透明数据共享和可测量质量标准的统一验证框架。文章批判性评估了动物测试的局限性（如LD50实验仅60%可重复性），展示了NAMs在皮肤致敏（OECD TG 497）、肝毒性预测（DILI模型灵敏度87%）等领域的成功案例，呼吁建立跨行业协作机制加速NAMs在监管决策中的应用。

　　

从动物实验到人类相关新方法学的范式转变
传统动物测试在预测人类毒性方面存在显著局限性——大鼠急性口服LD₅₀研究显示仅60%结果可重复，而Draize兔眼刺激试验的实验室间变异早已被证实。这促使全球转向包含体外（in vitro）、计算机（in silico）和化学（in chemico）技术的新方法学（NAMs），其核心优势在于更贴近人类生物学特性、伦理合规和成本效益。

NAMs的定义与发展里程碑
源自1959年"3R原则"的NAMs概念，经ECHA 2016年明确定义后快速发展。关键突破包括：2017年FDA发布预测毒理学路线图，2022年《FDA现代化法案2.0》首次明确允许NAMs用于药物审批，以及2024年ECHA发布"关键监管挑战"清单推动非动物方法。特别值得注意的是，FDA于2025年宣布逐步取消单抗类药物动物测试要求，标志着监管态度的重大转变。

科学验证与案例实证
皮肤致敏领域的成功案例最具说服力：OECD TG 442C/D/E系列测试结合定义式方法（DA）显示，与人体斑贴试验相比，NAMs的平衡准确率达88%，远高于动物实验（LLNA）的58%。在药物研发中，3D肝微组织模型对152种药物的DILI预测准确率达89%，而传统临床前模型常遗漏此类毒性。这些数据有力驳斥了"动物实验是金标准"的固有认知。

跨行业应用现状
不同行业呈现差异化应用图谱：

• 化妆品行业受欧盟2009年营销禁令驱动，已建立完整的皮肤吸收/刺激评估体系（如OECD TG 428/439）
• 制药领域通过ICH M7指南将QSAR模型纳入致突变杂质风险评估
• 农药行业采用呼吸道上皮模型（MucilAir）成功豁免90天吸入毒性试验

下一代风险评估（NGRA）革新
基于AOP框架的NGRA正在改变安全评估范式。以咖啡因风险评估为例，通过生理药代动力学（PBK）模型结合生物活性数据，证明消费者暴露量存在27倍安全边际。这种方法整合了暴露科学、机制毒理学和计算模型，实现从"危害识别"到"风险定量"的跨越。

标准化取代验证的创新路径
传统ECVAM验证流程（耗时2-5年，耗资20-50万欧元）正被新型标准所革新。微生理系统领域已建立关键标准：

• 明确流动速率范围（0.1-1 mL/min）
• 限定细胞传代次数（<15代）
• 标准化跨膜电阻（TEER）测量协议
  欧洲PEPPER平台通过预验证协作模式，将内分泌干扰物评估方法开发周期缩短60%。

实施路线图与协作倡议
建立全球NAMs知识库成为当务之急，需包含：

1. 含1,500+种特征化化合物的参考数据库
2. 标准化协议库（参照OECD TG格式）
3. 跨行业应用案例库
   FDA ISTAND试点项目已率先接受肝脏芯片数据提交，为监管协同树立典范。

当前，突破行业与地域壁垒，建立以"等效保护"为原则的统一框架，将成为实现21世纪毒理学愿景的关键。这场变革不仅关乎动物福利，更是提升人类健康保护水平的科学必然。