新型C9-单萜生物碱连翘嗪C的全合成及其通过TLR4/TRIF/NF-κB通路调控脓毒症急性肺损伤的治疗效应

本研究针对脓毒症急性肺损伤（ALI）缺乏高效疗法的临床困境，首次报道了新型C9-单萜生物碱连翘嗪C（FC）的模块化全合成（四步总收率45%，ee值95%）及其治疗机制。通过体外炎症细胞模型（MLE-12）和体内LPS诱导ALI小鼠模型，证实FC可剂量依赖性抑制TLR4/TRIF/NF-κB通路关键蛋白（TLR4、TRIF、p-NF-κB p65、p-IκB-α）表达，降低促炎因子TNF-α/IL-6水平，显著改善肺组织病理损伤、降低MPO活性及肺湿干重比。分子对接表明FC可干扰TLR4/TRIF信号复合物，为靶向该通路的ALI治疗提供新策略。

　　

脓毒症引发的急性肺损伤（ALI）如同隐秘的"呼吸杀手"，全球每天夺走约14,000条生命，重症监护室中过半脓毒症患者深受其害。当前临床依赖的糖皮质激素虽能缓解炎症，却伴随肌病、免疫抑制等严重副作用，使得靶向干预新药研发迫在眉睫。传统中药连翘果实（Forsythia suspensa）自古用于清热解毒，现代研究揭示其活性成分在抗肺部炎症中颇具潜力，但关键物质连翘嗪C（FC）——一种含稀有骨架的C₉-单萜生物碱，却因天然含量极低阻碍了深入探索。

面对这一困境，中国研究人员在山东省自然科学基金（YX23KJZ002）支持下，于《Bioorganic Chemistry》发表突破性研究。他们通过四步关键反应（Barbier反应构建碳链、Heck反应闭环、羟基还原、硼氢化氧化引入末端羟基），首次实现FC高效全合成（总收率45%，纯度95%），并系统阐明其通过TLR4/TRIF/NF-κB通路治疗脓毒症ALI的机制。

核心技术方法
研究采用LPS刺激小鼠肺上皮细胞（MLE-12）构建体外炎症模型，并通过气管滴注LPS建立小鼠ALI模型。通过ELISA检测血清、肺泡灌洗液（BALF）及肺组织中TNF-α/IL-6水平；评估肺组织湿干重比（W/D）和髓过氧化物酶（MPO）活性；采用Western blot分析TLR4/TRIF/NF-κB通路蛋白表达；结合分子对接模拟FC与TLR4/TRIF信号复合物的相互作用。

研究结果

1. 体外抗炎机制
   FC显著抑制LPS诱导的MLE-12细胞中TLR4、TRIF、磷酸化NF-κB p65（p-NF-κB p65）及磷酸化IκB-α（p-IκB-α）表达，并剂量依赖性降低TNF-α和IL-6释放。

2. 体内肺保护效应
   FC治疗组小鼠肺组织病理损伤显著减轻，表现为肺泡结构改善、炎性浸润减少；同时肺湿干重比（W/D）下降，MPO活性降低，提示中性粒细胞浸润受抑。

3. 炎症因子调控
   在血清、BALF及肺组织中，FC剂量依赖性抑制LPS诱导的TNF-α和IL-6水平升高，与体外结果一致。

4. 通路蛋白抑制
   FC有效阻断LPS激活的TLR4/TRIF/NF-κB通路，下调肺组织内TLR4、TRIF、p-NF-κB p65及p-IκB-α表达水平。

5. 分子作用基础
   分子对接预测FC可通过空间位阻干扰TLR4与TRIF的信号传导复合物形成，为实验现象提供结构生物学解释。

结论与意义
本研究首次实现稀有天然生物碱FC的模块化高效合成，突破天然提取瓶颈。通过双模型验证，FC通过靶向抑制TLR4/TRIF信号轴，阻断下游NF-κB激活及IκB-α降解，最终减少TNF-α/IL-6等炎症风暴关键因子释放，从而缓解脓毒症ALI的肺组织损伤。该发现不仅为连翘"清热解毒"的传统功效提供现代药理学注解，更重要的是：

1. 机制创新性：揭示FC通过TLR4/TRIF（而非MyD88）分支特异性调控炎症通路，为选择性免疫调节提供新视角；
2. 治疗优势：相较于糖皮质激素的广泛免疫抑制，FC的靶向作用可望降低副作用风险；
3. 药物开发价值：45%的总收率为后续结构优化与制剂研究奠定基础，推动源自中药的创新药物研发。
   这项研究为攻克脓毒症ALI这一临床危症提供了兼具传统智慧与现代科学依据的候选药物，也为靶向TLR4/TRIF通路的抗炎药物设计开辟了新路径。