化疗通过可变剪接上调circFLNB抑制结直肠癌进展的机制研究

本研究针对结直肠癌(CRC)治疗中缺乏有效分子靶点的难题，揭示了化疗通过可变剪接(AS)上调环状RNA circFLNB的新机制。研究人员通过circRNA微阵列筛选发现circFLNB在化疗后CRC组织中显著高表达，体内外实验证实其通过miR-3127-3p/MOB1B/Hippo通路抑制肿瘤生长转移，并鉴定出QKI和CELF4为关键剪接调控因子。该研究为CRC的分子靶向治疗提供了新思路，相关成果发表于《Cancer Letters》。

　　

在全球癌症负担中，结直肠癌(CRC)始终是威胁人类健康的重大疾病，尤其令人担忧的是近年来年轻患者发病率显著上升。尽管诊疗技术不断进步，转移性CRC患者的5年生存率仍低于20%，这主要归因于缺乏有效的分子诊断标志物和精准治疗靶点。在这样的背景下，环状RNA(circRNA)作为新兴的非编码RNA分子，因其独特的闭环结构和调控功能成为研究热点。然而，癌症特异性circRNA的形成机制及其在治疗中的作用仍知之甚少。

中南大学湘雅医院的研究团队在《Cancer Letters》发表的重要研究成果，首次揭示了化疗药物通过调控可变剪接(Alternative Splicing, AS)促进circFLNB生成的全新抗肿瘤机制。研究人员采用circRNA微阵列技术对172对CRC临床样本进行筛查，结合RNA-seq和rMATS分析，发现源自FLNB基因的circFLNB在化疗后组织中显著上调。通过构建Nomogram预后模型证实，circFLNB高表达与患者良好预后显著相关。

研究团队运用多组学技术手段开展系统探究：采用qRT-PCR验证circFLNB表达谱；通过Transwell和小鼠异种移植模型评估其生物学功能；利用生物信息学预测结合荧光素酶报告基因实验鉴定miR-3127-3p为直接作用靶点；运用RNA干扰和过表达技术阐明QKI/CELF4对剪接的调控作用。

【临床样本分析】
172对CRC组织检测显示circFLNB在癌组织中低表达，而在接受化疗的患者组织中显著升高。预后分析表明circFLNB可作为独立预后因子，其构建的Nomogram模型预测效能优异。

【功能机制解析】
体外实验证实circFLNB过表达显著抑制CRC细胞增殖、迁移和侵袭能力；小鼠移植瘤模型显示circFLNB可使肿瘤体积缩小63%。机制研究表明circFLNB通过"分子海绵"作用吸附miR-3127-3p，解除其对MOB1B mRNA的抑制，从而激活Hippo信号通路的关键效应分子YAP/TAZ。

【剪接调控发现】
RNA-seq数据分析锁定QKI和CELF4为化疗响应性剪接因子。实验证实敲低QKI/CELF4可完全阻断化疗诱导的circFLNB生成，而过表达则能模拟化疗效果。进一步发现这两个因子通过识别FLNB pre-mRNA特定序列调控外显子环化。

在讨论部分，作者强调该研究首次阐明化疗药物通过重塑剪接因子网络调控circRNA生成的分子途径。QKI和CELF4介导的可变剪接转换，使FLNB基因从生成线性mRNA转向产生具有抑癌功能的circFLNB，这种"基因产物重编程"效应为理解化疗药物的表观遗传调控提供了新视角。特别值得注意的是，circFLNB/miR-3127-3p/MOB1B轴与Hippo通路的交叉调控，揭示了非编码RNA与经典信号通路对话的新机制。

该研究的临床意义在于：circFLNB表达水平可作为化疗敏感性预测标志物；基于剪接调控的联合治疗策略可能克服化疗耐药；设计的预后模型已具备临床转化潜力。作者建议未来研究应探索其他抗癌药物是否具有类似剪接重编程功能，以及QKI/CELF4调控网络在其他癌种中的普适性，为发展新型RNA靶向药物提供理论依据。