胆囊收缩素2受体拮抗剂YF476通过抑制内嗅皮层CCK+神经元超活化改善颞叶癫痫发作

针对颞叶癫痫(TLE)药物耐药难题，香港城市大学团队发现内嗅皮层(EC)胆囊收缩素阳性(CCK+)神经元在癫痫发作中起关键作用。通过小鼠和巴马小型猪模型证实，CCK-2受体拮抗剂YF476能显著抑制自发性发作频率，其疗效优于苯妥英和卡马西平，为开发新型抗癫痫药物提供了全新靶点。

　　

癫痫作为威胁全球1-2%人口的神经系统疾病，约三分之一患者对现有抗癫痫药物产生耐药性，其中颞叶癫痫(TLE)因其海马病变特征成为最难治的类型。传统抗癫痫药物如苯妥英和卡马西平虽能控制症状，但存在剂量依赖的毒副作用。近年研究发现，内嗅皮层中富含胆囊收缩素(CCK)的神经元可能通过增强突触可塑性参与癫痫发生，但具体机制尚未阐明。

香港城市大学的研究团队在《Epilepsy》发表突破性研究，首次揭示CCK-2受体拮抗剂YF476的抗癫痫潜力。研究人员采用纤维光度术实时监测CCK-Cre小鼠内嗅皮层神经元钙动力学，结合巴马小型猪模型验证疗效。关键技术包括：1）海马内注射海人酸(KA)建立TLE模型；2）AAV病毒介导的GCaMP6s钙信号标记；3）深度学习辅助的癫痫行为分析；4）微型猪MRI引导的立体定位注射。

3.1 内嗅皮层谷氨酸能CCK神经元在癫痫诱导后超活化
通过AAV9-CaMKIIα-DIO-GCaMP6s标记CCK⁺神经元，发现KA注射后钙瞬变幅度较对照组增加80%（p<0.001），且持续至第4周。免疫荧光显示85.5%的GCaMP6s⁺神经元共表达CCK8和CaMKIIα，证实其为谷氨酸能神经元。

3.2 CCK⁺神经元在自发性发作期间被激活
记录到发作前钙信号波动提前出现（黑箭头标示），发作期ΔF/F值升高7倍（7.27±1.27 vs 1.23±0.54，p<0.001），表明该神经元群直接参与发作启动。

3.3 CCK-2R拮抗剂抑制TLE小鼠发作频率
YF476治疗组发作频率较基线下降50%（6.75±2.08 vs 12.38±1.74次/周，p=0.0304），停药后仍维持疗效（5.50±1.89次/周，p=0.0082），而生理盐水组无显著变化。

3.4 YF476在小型猪模型中的验证
MRI引导的KA注射成功建立猪TLE模型。YF476使严重发作减少87%（0.13±0.10 vs 1±0，p<0.0001），疗效优于苯妥英（仅治疗期有效）。对轻度发作的抑制率达73.2%，与卡马西平相当但剂量更低（316 ng/kg vs 12 mg/kg）。

该研究首次阐明内嗅皮层CCK⁺神经元通过CCK-2R通路促进癫痫发作的机制。YF476在跨物种模型中展现的持续抗癫痫效果，突破了现有药物仅靶向离子通道的局限。特别值得注意的是，研究建立的微型猪癫痫模型填补了临床前研究缺乏大型哺乳动物模型的空白。未来需进一步评估YF476的药代动力学特性，但其低剂量高效的特点已为开发新一代抗癫痫药物指明方向。这项成果不仅为理解TLE发病机制提供新视角，更为药物难治性癫痫患者带来希望。