基于MagSort技术的高PRA患者血清表位鉴定及HLA-A*01:01新型结合模式的发现

本研究针对高群体反应性抗体(PRA)患者血清中人类白细胞抗原(HLA)表位识别难题，采用磁珠分选(MagSort)技术结合吸附-洗脱方法，成功鉴定出7个已知表位并发现2个新型结合模式（针对HLA-A01:01和B53:01）。通过竞争实验和结构分析，首次揭示163/167位点理化特性对A*01:01抗体结合的关键作用，为HLA免疫原性研究提供了新视角。

　　

在器官移植领域，人类白细胞抗原（HLA）不匹配引发的抗体介导排斥反应仍是临床难题。尤其对于高群体反应性抗体（PRA）患者，其血清中混杂的多种HLA抗体会显著增加移植失败风险。传统表位（eplet）鉴定方法面临多抗体干扰、操作复杂等瓶颈，而现有HLA表位数据库亟需实验验证的补充。

One Lambda, Inc.（隶属Thermo Fisher Scientific）的研究团队创新性地采用HLA特异性磁珠分选技术（MagSort），从具有移植史的高PRA患者血清中精准分离抗体。通过靶向11种HLA变体（包括A01:01、B53:01等）的吸附-洗脱实验，结合单克隆抗体竞争分析和晶体结构建模，不仅验证了6个已知表位，更首次发现两种新型结合模式。其中针对A*01:01的抗体与既往Lima等报道的抗体共享关键结合位点（163/167位点），揭示了该区域理化特性对表位识别的决定性作用。该成果发表于《Human Gene》，为临床HLA配型提供了新靶点。

关键技术包括：1）MagSort磁珠分选技术分离血清中HLA特异性抗体；2）LABScreen单抗原微珠检测系统进行抗体结合谱分析；3）基于晶体结构的表位理化特性预测；4）使用表达特定HLA的永生化细胞系进行验证。

【研究结果】

1. MagSort分离高PRA血清抗体：初始HLAMatchMaker预测29个潜在表位，经磁珠分选后锁定7个主要表位，显著提高鉴定效率。
2. 新型结合模式发现：发现A01:01抗体与B53:01抗体的独特结合特征，后者与B*15:12等亚型存在交叉反应。
3. 表位结构解析：通过A*01:01晶体结构比对，证实163位（谷氨酸）和167位（精氨酸）形成的电荷互补区是抗体结合的关键。

【结论】该研究通过创新抗体分离技术，实现了高PRA血清表位的精准解析。发现的163/167位点机制为HLA免疫原性研究提供了分子基础，而MagSort技术的应用范式有望推动临床抗体筛查的标准化。研究不仅完善了HLA表位数据库，更为移植前脱敏治疗和供体选择策略优化提供了理论依据。