Beclin1介导的血管自噬负调控脑皮质梗死后丘脑血管新生及继发性神经损伤的机制研究

本研究针对脑梗死后丘脑区血管新生机制不清的问题，通过MCAO模型结合siRNA技术，发现Beclin1介导的血管自噬通过下调ANG-2/VEGF抑制丘脑血管新生，加剧继发性神经损伤；抑制Beclin1可促进血管新生并改善认知功能，为卒中后神经修复提供新靶点。

　　

脑梗死后远端脑区的继发性损伤是影响神经功能恢复的关键因素，其中丘脑作为皮质下重要中转站，其血管新生过程与认知功能密切相关。然而，丘脑区血管新生的调控机制尚未明确，尤其是自噬过程在其中的作用存在争议。中山大学的研究团队在《IBRO Neuroscience Reports》发表的研究，首次揭示了Beclin1介导的血管自噬通过ANG-2/VEGF通路负向调控丘脑血管新生的分子机制。

研究采用两肾两夹法构建肾血管性高血压大鼠(RHRSP)模型，结合远端大脑中动脉闭塞(MCAO)技术建立局灶性脑梗死模型。通过立体定位注射Becn1-siRNA慢病毒载体靶向干预丘脑血管自噬，运用Morris水迷宫评估认知功能，并采用免疫荧光双标、血管分离技术和免疫印迹等方法系统分析血管新生与自噬标志物的共定位关系。

次级丘脑损伤与行为学表现
MCAO术后7天，丘脑区出现NeuN⁺神经元减少和GFAP⁺星形胶质细胞增生等继发性损伤特征。Becn1-siRNA干预显著改善神经元存活率(降低40.2%)和空间记忆能力(平台穿越次数增加2.1倍)，证实抑制自噬具有神经保护作用。

Beclin1与自噬在丘脑血管中的表达
免疫荧光显示CD31⁺内皮细胞中Beclin1和LC3-II表达量较假手术组分别升高3.5倍和4.8倍，且BrdU⁺/Laminin⁺增殖内皮细胞增加2.3倍，提示自噬激活与血管新生存在时空关联。

Beclin1敲降对血管自噬和新生的影响
靶向敲降使丘脑血管中Beclin1和LC3-II水平分别降低62%和57%，同时血管密度增加1.8倍，证实Beclin1是调控血管自噬的关键分子。

ANG-2/VEGF通路的调控机制
研究发现LC3与ANG-2/VEGF在丘脑血管中共定位，且Becn1-siRNA使ANG-2和VEGF蛋白水平分别提升2.1倍和1.7倍，而ANG-1无显著变化，揭示自噬选择性降解促血管新生因子。

该研究创新性提出"血管自噬-ANG-2/VEGF轴"调控理论，阐明Beclin1通过降解ANG-2/VEGF抑制丘脑血管新生的分子机制。临床转化方面，靶向干预血管自噬可为卒中后认知障碍提供新型治疗策略。研究首次将自噬调控从神经元领域拓展至脑血管单元，为理解神经血管耦合机制提供新视角。方法学上建立的RHRSP-MCAO复合模型更好模拟人类卒中病理特征，而血管特异性siRNA递送技术为精准干预提供范例。未来需进一步探索自噬小体与ANG-2/VEGF的直接相互作用机制，以及不同卒中亚型中该通路的异质性。