白花丹醌通过调控PD-1/PD-L1轴和Treg细胞逆转T细胞耗竭抑制舌鳞癌免疫逃逸的机制研究

本研究针对舌鳞状细胞癌(TSCC)免疫逃逸中T细胞耗竭这一关键问题，探索了天然化合物白花丹醌(Plumbagin)的免疫调节作用。研究人员通过体外T细胞-肿瘤细胞共培养体系和两种小鼠模型（SCC7同种移植模型和4NQO诱导的原位模型），发现Plumbagin能显著降低PD-1表达、减少Treg细胞数量，同时提升Granzyme B和IFN-γ分泌，为TSCC免疫治疗提供了新策略。该成果发表于《Cancer Cell International》，为中药活性成分应用于肿瘤免疫微环境调控提供了理论依据。

　　

舌鳞状细胞癌(TSCC)作为最常见的口腔恶性肿瘤，其五年生存率长期徘徊在30-50%之间，免疫逃逸现象是治疗失败的关键因素。肿瘤微环境(TME)中持续存在的抗原刺激会导致T细胞功能耗竭，表现为PD-1等免疫检查点分子高表达、效应功能丧失。尽管PD-1抑制剂等免疫疗法取得一定进展，但临床响应率有限且易产生耐药性，这促使科学家寻找能重塑免疫微环境的新策略。

南昌大学第一附属医院江西省口腔疾病重点实验室的研究团队将目光投向传统中药活性成分——从白花丹中提取的萘醌类化合物白花丹醌(Plumbagin)。既往研究证实其具有抗炎、抗氧化和直接抗肿瘤作用，但对肿瘤免疫微环境的调控机制尚不明确。研究人员通过系统的体内外实验，首次揭示Plumbagin可通过多靶点调控逆转T细胞耗竭，相关成果发表在《Cancer Cell International》。

研究采用三大关键技术：1）建立体外T细胞耗竭模型（健康志愿者PBMC来源T细胞与CAL27/HSC3舌癌细胞Transwell共培养）；2）构建两种免疫活性小鼠模型（SCC7同种移植模型和4NQO化学诱导原位模型）；3）综合运用流式细胞术（检测PD-1表达、T细胞亚群和凋亡）、qRT-PCR（细胞因子mRNA水平）和免疫组化（肿瘤组织标志物分析）。

Plumbagin增强耗竭T细胞功能
通过CFSE增殖实验发现2.5μM Plumbagin处理可显著提升耗竭T细胞的增殖能力（p<0.05）。流式检测显示PD-1⁺CD8⁺T细胞比例从38.7%降至21.4%，同时凋亡相关蛋白表达下降。qRT-PCR证实Plumbagin上调Granzyme B（2.1倍）和IFN-γ（1.8倍），下调TGF-β（0.6倍）和IL-10（0.4倍）的mRNA水平（p均<0.01）。

动物模型验证抗肿瘤免疫
在SCC7移植瘤模型中，2 mg/kg Plumbagin组肿瘤体积较对照组减少62.3%（p<0.001）。流式分析显示脾脏CD8⁺/CD4⁺T细胞比值从1:1.2提升至1:0.8，PD-1⁺Treg细胞减少54.6%。4NQO原位模型同样观察到舌部肿瘤负荷减轻，IHC显示肿瘤组织PD-L1和TIM-3表达下调，而Granzyme B阳性细胞浸润增加。

调控机制解析
研究发现Plumbagin通过三重机制发挥作用：1）直接阻断PD-1/PD-L1信号轴；2）抑制CD4⁺CD25^highFOXP3⁺Treg细胞的招募和功能；3）重塑细胞因子网络（提升IFN-γ/Granzyme B，降低IL-10/TGF-β）。这种多靶点作用使其区别于单克隆抗体类药物，可能克服现有免疫治疗的耐药问题。

该研究首次系统阐明Plumbagin通过免疫微环境调控发挥抗TSCC作用，为中药活性成分应用于肿瘤免疫治疗提供了实验依据。特别值得注意的是，Plumbagin在2.5μM低浓度即可显著改善T细胞功能，且动物实验中未观察到肝肾功能损伤，显示良好的安全性。未来研究可进一步探索Plumbagin与PD-1抑制剂的协同效应，以及其在头颈鳞癌免疫治疗中的临床应用潜力。