日本参总皂苷通过调控巨噬细胞极化和肠道菌群缓解佐剂性关节炎的机制研究

研究人员针对类风湿关节炎(RA)中巨噬细胞极化失衡和肠道菌群失调的关键问题，开展日本参总皂苷(TSPJ)干预研究。通过LPS诱导RAW 264.7细胞和佐剂性关节炎(AIA)大鼠模型，发现TSPJ通过抑制HIF-1α/GLUT1/HK2/LDHA糖酵解通路降低M1型巨噬细胞极化，同时上调CD206+ M2a型比例，并显著恢复Eubacterium_coprostanoligenes_group等益生菌丰度。该研究为天然药物治疗RA提供了代谢-免疫-微生物组多靶点作用依据。

　　

类风湿关节炎(RA)作为一种慢性自身免疫性疾病，其典型特征是滑膜炎症进行性加重和骨侵蚀。目前临床治疗面临两大困境：一是传统药物如糖皮质激素和非甾体抗炎药对巨噬细胞表型转换的调节效果有限，约40%患者出现治疗抵抗；二是肠道菌群失调通过"肠-关节轴"触发免疫反应的现象日益受到关注，但具体机制尚未阐明。在这个背景下，湖南中医药大学的研究团队将目光投向了传统中药日本参(Panax japonicus)中的活性成分——日本参总皂苷(TSPJ)，该物质在民族医学中早有抗RA应用记载，但其对巨噬细胞代谢重编程和肠道菌群的调控机制仍是未解之谜。

研究团队采用多维度技术路线展开探索：通过LPS诱导RAW 264.7巨噬细胞建立体外炎症模型，结合CFA诱导的AIA大鼠模型；运用流式细胞术检测CD86⁺/CD206⁺巨噬细胞比例；采用ELISA和生化试剂盒定量炎症因子及代谢产物；借助micro-CT评估关节损伤；结合16S rRNA测序分析结肠内容物和黏膜菌群。这些方法为揭示TSPJ的多靶点作用机制提供了系统研究工具。

3.1节通过HPLC分析确认TSPJ主要含竹节参皂苷V(70.57%)等特征成分。3.2节发现TSPJ(≤500 μg/mL)可显著抑制LPS诱导的M1型巨噬细胞糖酵解，使葡萄糖消耗和乳酸产量分别降低42.7%和38.5%，同时下调IL-6和IL-1β水平。3.3节流式结果显示，200 μg/mL TSPJ使M1型比例从31.5%降至14.9%，M2a型比例从0.35%提升至13.2%。

在动物实验中(3.4节)，TSPJ(240 mg/kg)治疗30天使AIA大鼠踝关节温度恢复正常，micro-CT显示骨增生减少51.2%。4.1-4.3节揭示TSPJ通过双重机制发挥作用：一方面下调关节组织中HIF-1α、GLUT1、HK2和LDHA蛋白表达(降幅达40-60%)；另一方面显著恢复肠道菌群α多样性(Shannon指数提高1.8倍)，促进黏膜共生菌Eubacterium_coprostanoligenes_group(相对丰度从2.1%升至5.7%)和Christensenella(与关节炎评分呈负相关，R=-0.74)定植。

讨论部分指出，该研究首次阐明TSPJ通过"代谢-免疫-微生物组"三轴联动机制缓解RA：通过抑制HIF-1α介导的糖酵解通路阻断M1型巨噬细胞恶性循环；同时重塑肠道菌群生态，强化黏膜屏障功能。特别值得注意的是，TSPJ对低丰度益生菌(如Muribaculaceae)的调控作用可能与其多糖成分的益生元特性相关。这些发现为开发基于天然药物的RA治疗新策略提供了重要理论依据，相关成果发表在《Journal of Ginseng Research》上。