circDUSP1/miR-429/DLC1调控网络抑制三阴性乳腺癌恶性进展的分子机制研究

本研究针对三阴性乳腺癌(TNBC)缺乏有效靶向治疗的临床难题，通过揭示circDUSP1通过ceRNA机制吸附miR-429解除其对抑癌基因DLC1的抑制，首次阐明了circDUSP1/miR-429/DLC1调控网络在TNBC增殖迁移中的关键作用，为开发新型靶向治疗策略提供了理论依据。论文发表于《Scientific Reports》，实验采用临床样本与细胞模型相结合，通过功能获得/缺失实验证实该网络的肿瘤抑制功能。

　　

三阴性乳腺癌(TNBC)作为乳腺癌中最具侵袭性的亚型，因其缺乏雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER-2)表达，导致传统内分泌治疗和靶向治疗失效。尽管化疗联合免疫检查点抑制剂等新策略展现出潜力，但FDA尚未批准任何TNBC靶向药物，患者预后仍不理想。这种治疗困境的核心在于对TNBC分子机制认知的不足，特别是非编码RNA调控网络的探索仍存在重大空白。

遵义医科大学附属医院病理科的研究团队将目光聚焦于环状RNA(circRNA)这一新兴调控分子。前期研究发现miR-429在TNBC中异常高表达，可通过靶向抑制抑癌基因DLC1(Deleted in Liver Cancer 1)促进肿瘤进展，但上游调控机制尚未阐明。基于ceRNA竞争性内源RNA假说，研究人员通过生物信息学预测和实验验证，首次揭示了circDUSP1/miR-429/DLC1轴在TNBC中的关键作用，相关成果发表在《Scientific Reports》。

研究采用多组学技术联用的策略：通过生物信息学筛选TNBC差异表达circRNA；利用qRT-PCR验证circDUSP1在3对TNBC临床样本和细胞系(MDA-MB-231/MDA-MB-468)中的表达；采用RNase R消化、核质分离和FISH实验确认circDUSP1的环状特性和亚定位；通过CCK-8、Transwell等功能实验评估表型影响；结合双荧光素酶报告基因、RNA pull-down等技术验证分子互作；最后建立裸鼠移植瘤模型进行体内验证。

circDUSP1在TNBC中的表达特征
qRT-PCR显示circDUSP1在TNBC组织和细胞系中显著低表达。Sanger测序证实其由DUSP1基因外显子4反向剪接形成，RNase R抗性实验证明其环状稳定性，核质分离与FISH定位显示其主要分布于细胞质，这些特性为其发挥miRNA海绵功能奠定结构基础。

circDUSP1对TNBC细胞生物学行为的影响
功能实验表明：circDUSP1过表达显著抑制细胞增殖(CCK-8显示72小时OD值降低37%)、克隆形成(减少62%)和迁移侵袭能力(Transwell显示穿膜细胞数减少55%)，而敲除则产生相反效应。裸鼠实验进一步证实circDUSP1过表达使肿瘤体积缩小58%，重量减轻49%，Ki-67阳性率下降3.2倍。

分子机制解析
双荧光素酶报告基因证实circDUSP1直接结合miR-429(突变结合位点后荧光素酶活性恢复82%)，RNA pull-down显示circDUSP1探针可富集15倍miR-429。Western blot显示circDUSP1过表达使DLC1蛋白水平提升2.1倍，而共转染miR-429模拟物可逆转此效应。

调控网络的生物学意义
该研究首次阐明：circDUSP1作为分子海绵吸附miR-429，解除其对DLC1 mRNA的翻译抑制，从而激活DLC1/RhoGAP通路抑制Rho GTPase信号，最终阻碍TNBC细胞骨架重组和恶性进展。这一发现不仅完善了TNBC中非编码RNA调控的理论框架，更提供了三个潜在干预靶点：circDUSP1可作为诊断标志物，miR-429抑制剂或DLC1激活剂可能成为新型靶向药物。

值得注意的是，研究也存在样本量较小(仅3对临床样本)等局限，且未深入探讨DLC1下游的具体信号通路。未来研究可扩大临床队列验证circDUSP1的预后价值，并通过构建转移模型评估该网络对TNBC远端转移的影响，为临床转化提供更充分依据。