2018-2024年中国南方H9N2禽流感病毒分子特征、抗原变异及跨种传播潜力研究

本研究针对中国南方地区H9N2禽流感病毒（AIV）持续流行、抗原漂移及跨种传播风险，通过系统分离2018-2024年61株病毒，解析其HA基因h9.4.2.5谱系分化（5a/b/c亚支），发现98.36%毒株携带Q226L/H183N突变偏好人类受体（α-2,6-SA），其中YM/24615/2024表现双重受体结合特性。抗原图谱显示疫苗株（h9.4.2.5a）与流行株（h9.4.2.5b/c）存在显著差异，鸡体实验证实GD/0130H/2020等毒株可高效呼吸道复制传播。研究为疫苗更新和生物安全防控提供关键数据，发表于《Poultry Science》。

　　

禽流感病毒H9N2亚型自1966年首次从北美火鸡中分离后，已在全球禽类中形成地方性流行，尤其在中国家禽市场占据主导地位。这种低致病性禽流感病毒（LPAIV）虽对禽类致死率较低，却因其内部基因频繁参与重组，成为新型流感病毒产生的"基因库"，更令人担忧的是，职业暴露人群感染率已超10%。随着Q226L等关键位点突变积累，H9N2病毒对人类受体（α-2,6-唾液酸）的结合能力不断增强，犹如获得了一把打开人体细胞的"钥匙"。然而，现有疫苗对变异毒株的保护效果逐渐减弱，亟需系统性监测病毒演化轨迹。

广东省农业科学院的研究人员历时6年（2018-2024年）在中国南方六省采集8238份样本，通过鸡胚接种分离出61株H9N2病毒，采用全基因组测序、受体结合实验（α-2,3/α-2,6-SA糖聚合物）、血凝抑制试验（HI）和鸡体感染模型（10⁸ EID₅₀剂量），结合病理组织学评分（0-3分制）和qRT-PCR病毒载量检测，绘制出当前流行毒株的分子流行病学图谱。

主要发现

1. 谱系分化特征：HA基因系统发育显示60株属于h9.4.2.5谱系（33株5c/20株5b/7株5a），仅1株属h9.4.2.1。值得注意的是，5b分支毒株MY/24615/2024表现出独特的双受体结合能力，但其HA受体结合区（RBS）关键位点（T155/N183/Q226）与其他单受体毒株完全一致，提示存在未知分子机制。

2. 抗原漂移现象：HI试验揭示疫苗株（h9.4.2.5a）与流行株抗原差异显著，如GD/575/2023（5b）对同源病毒HI效价仅128，而YN/142/2020（5b）血清能交叉中和12株病毒（效价128-1024）。抗原图谱将毒株分为两大群：群1（疫苗株与5a）和群2（5b/c），这种"抗原分群"现象为疫苗更新敲响警钟。

3. 跨种传播潜力：受体结合实验显示60株病毒优先结合人类受体，其中5b分支YM/24615/2024对α-2,3-SA和α-2,6-SA的平衡结合能力（K_a值相近）使其成为潜在"桥梁病毒"。NA活性检测发现5c分支YN/0608C/2021酶活性最高，可能与病毒释放效率相关。

4. 禽类致病性：鸡体实验中，h9.4.2.5c分支GD/0130H/2020引起最严重病变——气管黏膜大面积坏死（病理评分2.8±0.3）、肺实质出血灶融合（3 dpi病毒载量log₁₀5.29±0.5）。值得注意的是，KM/23540/2023突破呼吸道局限，在十二指肠、肝脏中检出病毒，提示组织嗜性扩展。

5. 传播动力学：所有测试毒株均能经气溶胶传播，其中GD/0130H/2020在接触组鸡只中的病毒载量（log₁₀4.93±0.72）反超接种组，呈现"越传越强"的异常模式。

这项研究首次系统揭示中国南方H9N2病毒h9.4.2.5c分支已成为优势流行株，其人类受体偏好性、抗原变异及高效传播能力构成三重威胁。特别值得注意的是，YM/24615/2024的双重受体结合特性与常规RBS突变模式不符，暗示病毒可能通过非经典途径获得跨种传播能力。研究人员强调，当前疫苗株（h9.4.2.5a）与流行株的抗原差距已达3个以上HI滴度梯度，急需建立基于h9.4.2.5c分支毒株的疫苗更新策略。该成果为禽流感防控提供了精准的分子靶标和时空预警框架，对防范下一次流感大流行具有重要战略意义。