环介导等温扩增技术快速鉴定粪便样本中肠道细菌病原体的诊断价值评估

为解决传统细菌培养法耗时耗力、PCR检测需专业实验室的瓶颈，德国Jena大学医院团队开发了基于环介导等温扩增（LAMP）的eazyplex? Intestinal B检测系统。研究通过204例粪便样本验证显示，该技术对弯曲杆菌（Campylobacter）、沙门氏菌（Salmonella）和志贺毒素（stx）的检测灵敏度达71-88%，特异性达99-100%，30分钟即可完成检测，为基层医疗机构提供了一种快速精准的肠道病原体诊断方案。

　　

感染性腹泻每年导致全球160万人死亡，尤其在儿童和免疫力低下人群中危害显著。虽然多数病例可自愈，但沙门氏菌（Salmonella）、弯曲杆菌（Campylobacter）等病原体可能引发败血症，而产志贺毒素大肠杆菌（STEC）更会导致溶血性尿毒综合征（HUS）。传统细菌培养需2-3天，且对运输条件敏感的志贺菌（Shigella）检出率低；PCR虽灵敏快速，但依赖专业实验室和复杂设备。如何在资源有限场景实现快速精准诊断，成为临床微生物学的重大挑战。

德国耶拿大学医院（Jena University Hospital）的研究团队在《Diagnostic Microbiology and Infectious Disease》发表论文，评估了eazyplex? Intestinal B试剂盒的性能。这项研究采用前瞻性设计，收集2020-2022年间的204例急性腹泻患者粪便样本，以BD MAX? Enteric Bacterial Panel PCR为金标准，对比LAMP技术与传统培养法的检测效能。关键技术包括：使用含二硫苏糖醇（DTT）的Copan SL溶液处理样本，通过Bst DNA聚合酶进行恒温扩增，在Genie HT仪器上实时监测荧光信号，并采用Ct值≤40作为阳性阈值。

研究结果部分显示：

1. 灵敏度分析：LAMP对Ct值≤35样本的总体灵敏度达95.14%，其中弯曲杆菌（Campylobacter spp.）88.35%、沙门氏菌（Salmonella spp.）88%、志贺毒素（stx1/stx2）71.43%。值得注意的是，LAMP检出4例PCR阴性但培养阳性的沙门氏菌病例。
2. 时效性优势：平均检测时间9-16分钟，最快8.27分钟即可检出沙门氏菌，较传统培养缩短90%以上。
3. 混合感染识别：成功检出弯曲杆菌与沙门氏菌、stx1与stx2的混合感染，但存在1例C.jejuni/C.coli共感染仅检出单一菌种的情况。
4. 最低检测限：对S.Typhimurium、E.coli O157:H7等菌株的检测下限达10³-10⁴ CFU/mL。

讨论部分强调，该技术特别适用于三类临床场景：需快速决策抗生素使用的重症患者（如血便或发热病例）、无法开展PCR检测的基层机构，以及需要区分stx1/stx2亚型以评估HUS风险的STEC感染。尽管其灵敏度略低于PCR（尤其对Ct值>35的低载量样本），但研究者指出这反而可能减少无症状携带者的过度诊断。

这项研究的创新价值在于：首次系统验证LAMP技术对欧洲主要肠道病原体的检测效能，为《欧洲临床微生物与感染性疾病学会（ESCMID）》指南提供了即时检测（POCT）的循证依据。未来若结合耐药基因检测模块，将进一步完善精准治疗决策体系。正如通讯作者Jürgen R?del所述："30分钟的诊断窗口期，使医生能在首诊时即制定靶向治疗方案，这对改善抗生素合理使用具有里程碑意义。"