云南白药通过miR-155-5p/ATG5通路调控Th17/Treg细胞平衡抑制牙周炎的研究

本研究针对牙周炎治疗中Th17/Treg细胞失衡的关键问题，通过建立大鼠牙周炎模型，结合micro-CT、流式细胞术和双荧光素酶报告基因检测等技术，首次揭示云南白药(YNBY)通过上调miR-155-5p抑制自噬(ATG5)，调控Th17/Treg细胞分化平衡，为牙周炎免疫调节治疗提供新靶点。

　　

牙周炎作为全球第六大常见疾病，影响着近半数人群的口腔健康。这种由菌群失调引发的炎症性疾病，不仅导致牙槽骨进行性吸收，更是成年人牙齿丧失的首要原因。尽管细菌感染是始动因素，但越来越多的证据表明，机体免疫系统"误伤"般的过度反应——特别是辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)的平衡失调，才是造成牙周组织破坏的"元凶"。Th17细胞如同炎症"加速器"，通过分泌IL-17加剧组织损伤；而Treg细胞则扮演"刹车"角色，通过分泌IL-10等抗炎因子维持免疫稳态。如何精准调控这对"油门与刹车"的平衡，成为治疗牙周炎的新思路。

昆明医科大学的研究团队将目光投向了传统中药云南白药(YNBY)。这个以止血功效闻名的百年老药，近年被发现具有调节骨代谢和炎症反应的多重功效。研究人员通过结扎大鼠上颌第二磨牙建立牙周炎模型，结合体外CD4⁺T细胞分化实验，运用micro-CT三维重建、HE染色、流式细胞术等高通量技术，辅以miRNA测序和双荧光素酶报告基因验证，系统揭示了YNBY的作用机制。

研究首先通过micro-CT扫描发现，YNBY治疗组大鼠的釉牙骨质界至牙槽嵴顶(CEJ-ABC)距离显著缩短，HE染色显示牙龈组织结构明显改善。免疫组化检测显示，YNBY能显著降低促炎因子IL-17和RORγt的表达，同时提升抗炎因子IL-10和FoxP3水平。流式细胞术进一步证实，YNBY可将Th17细胞比例从模型组的14.3%降至7.8%，同时使Treg细胞比例从5.1%升至9.6%。

深入机制研究发现，YNBY通过上调miR-155-5p这个"分子开关"，靶向抑制自噬关键基因ATG5的表达。双荧光素酶报告基因实验证实，ATG5确实是miR-155-5p的直接作用靶点。当研究人员使用miR-155-5p抑制剂时，YNBY对Th17/Treg平衡的调节作用被显著削弱，这如同找到了YNBY发挥作用的"密码本"。

该研究创新性地将传统中药与现代免疫学相结合，不仅阐明了YNBY通过miR-155-5p/ATG5轴调控自噬水平，进而影响Th17/Treg细胞分化的分子机制，更为牙周炎的免疫治疗提供了新策略。相关成果发表在《International Immunopharmacology》杂志，为中药现代化研究提供了典范。

主要技术方法包括：建立大鼠牙周炎结扎模型，采用micro-CT进行牙槽骨三维定量分析，流式细胞术检测Th17(CD4⁺IL-17⁺)和Treg(CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺)细胞比例，qPCR和Western blot检测相关基因和蛋白表达，双荧光素酶报告基因验证miR-155-5p与ATG5的靶向关系。

YNBY alleviates alveolar bone resorption in rats with periodontitis部分显示，micro-CT定量分析证实YNBY显著抑制牙槽骨吸收，组织学染色显示胶原纤维排列更有序。免疫组化显示YNBY组LC3阳性细胞数减少，提示自噬水平降低。

Discussion部分强调，这是首次揭示YNBY通过miRNA调控自噬影响Th17/Treg平衡的作用机制。miR-155-5p如同"分子调节器"，通过抑制ATG5介导的自噬过程，改变CD4⁺T细胞分化命运。这种调控既抑制了促炎的Th17细胞，又促进了抗炎的Treg细胞，形成"双管齐下"的治疗效果。

Conclusion部分总结，YNBY通过miR-155-5p/ATG5轴调控自噬，重塑Th17/Treg平衡，为牙周炎治疗提供了新的免疫调节策略。该研究不仅拓展了传统中药的现代应用价值，也为开发基于miRNA的靶向治疗提供了理论依据。