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黄鳍金枪鱼肠道共生菌Acinetobacter seifertii YFT067的益生特性及其对宿主脂质代谢的调控机制研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月21日 来源:Animal Research and One Health CS2.5
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本文首次从野生黄鳍金枪鱼肠道分离出Acinetobacter seifertii YFT067菌株,通过全基因组测序和斑马鱼饲喂实验证实其具有显著益生潜力:耐受胃肠环境(SGJ/SIJ+0.3%胆盐存活率>80%)、强粘附性(自聚集率>60%),并能显著提升宿主增重率(WGR↑)、饲料转化率(FCR↓)及消化酶活性(LPS/AMS↑)。研究发现该菌通过上调fabp/fatp4/acat1等基因促进长链脂肪酸(LCFAs)吸收,激活pltp/cetp/nceh1a通路优化胆固醇代谢,同时使肠道SCFAs(丙酸/丁酸/戊酸含量提升21-65%)和杯状细胞数量倍增。研究为高代谢鱼类养殖提供了新型微生物制剂开发的理论基础。
从南海捕获的野生黄鳍金枪鱼肠道内容物中分离出的YFT067菌株,经16S rRNA鉴定为Acinetobacter seifertii,扫描电镜显示其细胞尺寸2.8-4.8μm。全基因组分析(4.09Mb,GC含量38.48%)揭示其富含糖苷水解酶(GHs)和脂代谢相关基因,并能合成β-内酯类次级代谢产物。体外实验证实其对模拟胃肠液(pH 3.5-6.8)和0.3%胆盐耐受性优异,3小时存活率超80%,且具有强自聚集能力(8小时达75%)和疏水性(二甲苯体系>60%)。
108 CFU/g剂量饲喂斑马鱼6周后,实验组体重增长率(WGR)和特定生长率(SGR)较对照组显著提升(p<0.01),饲料系数(FCR)降低23%。肠道消化酶检测显示脂肪酶(LPS)和α-淀粉酶(AMS)活性分别增加1.8倍和1.5倍(p<0.05),但超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化指标变化不显著。组织学观察发现肠绒毛形态完整且杯状细胞数量倍增(PAS染色证实)。
16S rRNA测序显示YFT067改变了肠道菌群结构:优势菌Cetobacterium相对丰度从72.4%降至40.3%(p=0.02),而Acinetobacter从9.0%飙升至56.0%(p=0.004)。PICRUSt预测显示脂代谢、能量代谢通路显著富集(p<0.01)。气相检测证实丙酸(64.7%↑)、丁酸(21.1%↑)和戊酸(44.0%↑)含量提升,占总SCFAs的15.6%。
转录组分析发现165个上调基因主要富集于脂肪消化吸收通路:脂肪酸转运蛋白FATP4和ACAT1分别促进LCFAs内流和胆固醇酯化;载脂蛋白ApoA1b/ApoA4a协调乳糜微粒(CM)组装。胆固醇代谢中,PLTP和CETP调控极低密度脂蛋白(VLDL)向高密度脂蛋白(HDL)转化。此外,甘氨酸代谢相关基因agxtb/bhmt表达上调,可能通过一碳单位循环辅助能量供应。
该研究首次揭示金枪鱼肠道Acinetobacter通过"微生物-代谢物-宿主基因"三级调控网络优化脂质利用,为破解高代谢鱼类养殖中的能量供给难题提供了新思路。后续需在黄鳍金枪鱼成体验证YFT067的最佳添加剂量,并开发基于SCFAs缓释技术的复合益生菌制剂。
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