N-糖基化修饰稳定TNFAIP6通过激活PI3K-AKT通路促进卵巢癌转移的机制研究

卵巢癌转移机制与治疗抵抗是临床重大挑战。南京妇女儿童保健医院团队发现TNFAIP6通过N-糖基化修饰逃逸泛素化降解，激活PI3K/AKT信号通路驱动EMT进程，同时塑造免疫抑制微环境。该研究为卵巢癌靶向治疗提供新策略，发表于《Cellular Signalling》。

　　

卵巢癌作为妇科恶性肿瘤中的"隐形杀手"，其五年生存率在晚期患者中不足30%，主要归咎于难以遏制的腹腔转移和治疗抵抗。当前临床面临两大困境：一是转移机制尚未完全阐明，二是缺乏有效的靶向干预手段。肿瘤坏死因子α诱导蛋白6（TNFAIP6）虽在肝癌、胃癌中被报道具有促癌作用，但其在卵巢癌中的生物学功能及调控机制仍是未解之谜。

南京妇女儿童保健医院的研究团队通过整合TCGA和GEO数据库的多组学数据，结合机器学习算法，首次将TNFAIP6锁定为卵巢癌转移的关键驱动因子。研究发现，这种分泌蛋白通过获得N-糖基化修饰（一种常见的蛋白质翻译后修饰）而逃逸泛素-蛋白酶体降解系统，在癌细胞内异常蓄积。当研究人员使用慢病毒载体进行基因操纵时发现，敲低TNFAIP6可显著抑制卵巢癌细胞侵袭迁移能力，而过表达则促进腹膜播散。机制研究表明，TNFAIP6通过激活磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B（PI3K/AKT）信号通路，诱导上皮间质转化（EMT）进程。更值得注意的是，这种蛋白还能重塑肿瘤免疫微环境，与免疫检查点抑制剂和化疗耐药显著相关。该成果发表于信号转导领域权威期刊《Cellular Signalling》。

研究采用四大关键技术：①从TCGA和GSE数据库获取15对转移/原发灶样本进行转录组分析；②通过LASSO回归、支持向量机（SVM-RFE）和随机森林三种机器学习算法筛选特征基因；③构建慢病毒敲低/过表达体系结合Transwell和小鼠腹膜转移模型验证功能；④采用免疫共沉淀（Co-IP）检测蛋白泛素化水平，结合计算反卷积算法量化免疫细胞浸润。

【Overexpressed TNFAIP6 is a metastasis-associated driver in OC and predicts poor clinical outcomes】
通过分析GSE133296和GSE178913数据集发现，转移灶中TNFAIP6 mRNA水平显著升高（log₂FC≥1）。机器学习算法一致将其列为转移特征基因首位。免疫荧光显示转移组织蛋白表达量较原发灶增加3.2倍（p<0.001），且高表达患者总生存期缩短47%（HR=2.11, p=0.003）。

【N-glycosylation stabilizes TNFAIP6 protein】
质谱分析鉴定出TNFAIP6的Asn⁸¹和Asn¹⁶⁷位点存在N-糖基化修饰。使用糖基化抑制剂衣霉素处理后，蛋白半衰期从18小时缩短至6小时。Co-IP实验证实糖基化修饰通过阻碍E3泛素连接酶TRIM21的结合，使泛素化水平降低62%。

【TNFAIP6 activates PI3K-AKT-EMT axis】
Western blot显示过表达TNFAIP6使p-AKT^Ser473水平升高3.5倍。使用AKT抑制剂（Akt-IN-1）可逆转其促转移效应。RNA-seq分析发现EMT标志物波形蛋白（Vimentin）上调4.2倍，而E-钙黏蛋白（E-cadherin）下调71%。

【Correlation with immunosuppressive microenvironment】
CIBERSORT分析显示TNFAIP6高表达样本中M2型巨噬细胞浸润增加2.8倍（p=0.007），细胞毒性T细胞减少58%。TIDE算法预测其对PD-1抑制剂响应率降低42%（AUC=0.73）。

该研究首次阐明TNFAIP6通过"糖基化-蛋白稳定-PI3K/AKT激活-EMT诱导"级联反应驱动卵巢癌转移的分子机制。其创新性体现在三方面：①发现N-糖基化是调控TNFAIP6稳定性的关键开关；②揭示该蛋白同时具有促转移和免疫调节双重功能；③提出TRIM21-TNFAIP6-AKT轴可作为治疗靶点。临床转化价值在于：TNFAIP6既可作为预后生物标志物，其糖基化位点又为开发小分子抑制剂提供精确靶标。未来研究可探索糖基化抑制剂与免疫治疗的联合策略，为攻克卵巢癌治疗抵抗提供新思路。