重组抗菌肽TP4对结肠癌细胞HT-29的靶向凋亡效应及机制研究

来自台湾的研究人员针对结肠癌治疗需求，通过重组表达技术获得罗非鱼抗菌肽TP4，系统评估其对HT-29结肠癌细胞的选择性杀伤作用。研究发现TP4通过调控BAX/CASP3/BCL-2通路诱导癌细胞凋亡（IC50 15μg/mL），且对正常HGF-1细胞毒性较低（IC50 25μg/mL），MTT/LDH/MDA等实验证实其通过破坏氧化还原平衡发挥抗癌效应，为开发新型靶向抗癌药物提供理论依据。

　　

这项研究深入解析了源自尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的25个氨基酸阳离子抗菌肽——罗非鱼皮西丁4号(Tilapia piscidin 4, TP4)的抗结肠癌机制。通过毕赤酵母(Pichia pastoris)KM71H表达系统重组生产的TP4，经镍柱(Ni–NTA)纯化后展现双重特性：不仅具有广谱抗菌活性（经MIC/MBC实验验证），更显示出显著的选择性抗癌效果。

研究团队采用多维度检测方法揭示TP4的作用机理：MTT法显示TP4对HT-29结肠癌细胞的半数抑制浓度(IC₅₀)为15μg/mL，显著低于对正常牙龈成纤维细胞(HGF-1)的25μg/mL；LDH释放实验证实其细胞膜破坏作用；TAS/TOS和MDA检测则发现TP4能特异性扰乱癌细胞的氧化还原平衡，导致氧化应激水平飙升。

分子机制研究表明，TP4通过"死亡开关"BAX基因的上调和生存因子BCL-2的下调，激活半胱天冬酶3(CASP3)介导的凋亡通路（Annexin V/RT-qPCR/ELISA多方法验证）。这些发现不仅阐明TP4作为天然抗菌肽的抗癌新功能，更为其开发为特异性靶向结肠癌的生物制剂提供了扎实的实验基础。