Glabridin增强α-arbutin透皮吸收及抗黑色素生成作用的分子机制研究

本研究针对结直肠癌治疗中药物递送效率低、毒副作用大的问题，开发了基于牛奶酪蛋白纳米颗粒(CNPs)的喜树碱(CPT)靶向递送系统。通过UV-vis、FTIR、TEM等技术证实成功构建CPT@CNPs（载药率85%），其粒径141-169nm且呈现pH响应性缓释特性。体外实验显示CPT@CNPs对HCA-7癌细胞抑制率(72%)显著高于游离CPT(p<0.001)，同时保持正常细胞>80%存活率，为结直肠癌靶向治疗提供了新型生物相容性载体。

　　

在癌症治疗领域，结直肠癌作为全球死亡率排名前三的恶性肿瘤，其治疗面临药物水溶性差、靶向性不足和系统毒性大等关键挑战。传统化疗药物喜树碱(CPT)虽具有显著抗肿瘤活性，但存在稳定性差、生物利用度低等问题。如何构建既能保护药物活性、又能精准递送的高效载体，成为当前药物递送领域的研究热点。

Northern Border University（沙特阿拉伯）的研究团队另辟蹊径，将目光投向牛奶中的天然蛋白——酪蛋白(casein)。这种具有两亲性的生物大分子，因其独特的胶束结构和良好的生物相容性，被视为理想的药物载体候选。研究人员通过酸沉淀法从生牛乳中提取高纯度酪蛋白，采用自组装技术构建了载药纳米颗粒(CPT@CNPs)，相关成果发表在《Journal of Drug Delivery Science and Technology》。

研究主要采用四大关键技术：1) pH调控酸沉淀法提取酪蛋白；2) 动态光散射(DLS)和Zeta电位表征纳米颗粒理化性质；3) 透射电镜(TEM)与原子力显微镜(AFM)联用进行形貌学分析；4) MTT法评估体外抗肿瘤活性。通过建立人结直肠癌细胞(HCA-7)和正常内皮细胞(HUVECs)的对比模型，系统评价了载药体系的靶向性。

Extraction of Casein Protein
采用梯度pH调控法从生牛乳中分离酪蛋白，当pH降至4.6时形成白色凝乳，经乙醇-乙醚(1:1)洗涤后获得纯度>95%的酪蛋白，UV-vis特征吸收峰位于270nm。

Preparation of Casein
自组装形成的CNPs呈球形单分散状态，DLS显示空白CNPs粒径141±3nm，载药后增至169±5nm。AFM三维形貌显示颗粒表面光滑，高度分布证实CPT成功包裹在蛋白网络内部。

Drug Release Profile
体外释放实验显示，CPT@CNPs在pH7.4条件下72小时累计释放78.5%，而在肿瘤微环境(pH5.0)下释放速率提升1.8倍，呈现明显的pH响应特性。

Biocompatibility Analysis
体内实验表明，CPT@CNPs处理组主要器官未见病理性损伤，血清生化指标与对照组无统计学差异，证实载药系统具有良好的生物安全性。

Cellular Uptake
荧光显微镜观察显示，Cy5标记的CNPs在HCA-7细胞中的内吞效率是游离药物的3.2倍，且主要分布在溶酶体区域，为后续的pH响应释放创造条件。

该研究创新性地将食品级酪蛋白转化为高效药物载体，其85%的载药效率和72%的肿瘤抑制率显著优于传统剂型。特别值得注意的是，CPT@CNPs对正常细胞的保护作用(pH选择性释放机制)和良好的器官分布特性(避免肝脏首过效应)，为临床转化提供了重要依据。这种"天然蛋白改造策略"不仅为结直肠癌治疗提供了新思路，也为其他疏水性抗肿瘤药物的递送系统设计提供了范式参考。