巴基斯坦HCV变异株RT-LAMP检测技术的开发与应用

为解决巴基斯坦HCV诊断中RT-qPCR灵敏度不足、耗时长且成本高的问题，研究人员开发了靶向HCV 5' UTR的RT-LAMP技术。该技术通过简并引物设计覆盖多种基因型，优化反应参数后实现60分钟快速检测，灵敏度达131拷贝，较RT-qPCR（82%灵敏度）提升至100%，并能识别71%假阴性，为大规模筛查提供高效解决方案。

　　

丙型肝炎病毒(HCV)的消除亟需改进诊断技术，尤其在巴基斯坦等高需求地区。传统实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)存在灵敏度(82%)和特异性局限，且耗时费钱。逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)技术脱颖而出——研究者首次针对巴基斯坦流行株，设计靶向HCV 5'非翻译区(5' UTR)的简并引物，整合当地及国际参考基因型序列。通过优化反应时间、体积、引物浓度和温度等关键参数，建立三重验证体系：常规PCR、商用RT-qPCR与RT-LAMP并行检测。结果显示，RT-LAMP检测限低至131拷贝，100%灵敏度/特异性碾压RT-qPCR，更揪出71%假阴性样本。60分钟完成检测的特性，配合BLAST验证的特异性（与黄病毒科无显著同源），使其成为大规模筛查的利器。这项技术突破为HCV防控提供了高敏、快速且经济的"全垒打"方案。