血清细胞外囊泡中SARS-CoV-2相关蛋白的鉴定：长新冠潜在生物标志物的发现

为解决长新冠（long COVID）缺乏可靠生物标志物的问题，研究人员通过分析14名长新冠患者的血清细胞外囊泡（EVs），首次鉴定出65种SARS-CoV-2复制酶多蛋白1ab（Pp1ab）特异性肽段，其中"GSLPINVIVFDGK"肽段在12/14患者中持续存在。该研究揭示了EVs可能作为病毒成分的运输载体，为长新冠的病理机制和诊断提供了新方向。

　　

长新冠之谜：病毒蛋白如何在体内长期潜伏？
新冠疫情暴发四年后，约10%的感染者仍受长新冠困扰，表现为疲劳、运动不耐受等症状，但医学界对其机制知之甚少。一个关键疑问是：康复后病毒是否仍在体内作祟？The Lundquist Institute for Biomedical Innovation（美国伦德奎斯特生物医学创新研究所）与Translational Genomics Research Institute（转化基因组学研究所）的联合团队在《Infection》发表突破性发现，首次在长新冠患者的血清细胞外囊泡中捕获到SARS-CoV-2的"分子指纹"。

研究人员采用多阶段实验策略：首先从14例长新冠患者运动前后的56份血清样本中分离EVs（使用EQULTRA-20A-1沉淀试剂盒），通过数据非依赖性采集质谱（DIA-MS）筛查病毒蛋白；随后用同位素标记合成肽（SIS）和并行反应监测（PRM）技术靶向验证；最后以20份2019年前健康人样本作为阴性对照。

主要发现：

1. 病毒蛋白的持久踪迹
   质谱分析检测到65种特异性匹配SARS-CoV-2复制酶多蛋白1ab（Pp1ab）的肽段，分布于22份样本中。这些肽段经pBLAST验证与人类蛋白无交叉反应，其中nsp3蛋白片段"GSLPINVIVFDGK"在85.7%患者中反复出现，且与Alpha、Delta、Omicron变异株高度保守。

2. EVs的"特洛伊木马"假说
   对照实验显示，所有健康人EVs均未检出病毒肽段，而长新冠组100%患者至少含1种阳性样本。这表明EVs可能作为病毒成分的运输载体，持续刺激免疫系统，这解释了为何长新冠患者存在慢性炎症状态。

3. 运动应激的放大效应
   样本采集设计独特，包含运动训练前后的静息与峰值运动状态。虽然论文未明确运动对EVs病毒载量的影响，但时间跨度达17±10个月的追踪提示这些生物标志物具有长期稳定性。

临床意义与展望
该研究首次将EVs中Pp1ab肽段确立为长新冠的潜在诊断标志物，其检测灵敏度达78.6%（22/28阳性样本），特异性100%（20/20阴性对照）。尤其值得注意的是，79%研究对象为轻症感染者，说明生物标志物与急性期严重程度无关。

局限性在于样本量较小且缺乏急性期对照，但研究开辟了三个新方向：①开发EVs检测试剂盒实现无创诊断；②探究抗病毒治疗对EVs病毒载量的影响；③揭示nsp3蛋白在慢性免疫激活中的作用机制。正如通讯作者William W. Stringer强调，这项发现为理解长新冠的"病毒持续理论"提供了直接分子证据，可能推动针对残留病毒的治疗策略开发。