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南瓜VQ蛋白CpVQ27负调控白粉病抗性的分子机制研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月23日 来源:Journal of Plant Physiology 4.0
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本研究针对南瓜(Cucurbita pepo)白粉病(PM)防治难题,通过转录组分析和qPCR验证发现VQ家族基因CpVQ27在感病材料M3中表达上调。研究人员采用病毒易感品种MRJ进行CpVQ27瞬时过表达实验,发现该基因过表达导致ROS和MDA含量升高,抗氧化酶活性及胼胝质(Callose)含量降低,防御相关基因表达下调,最终加剧白粉病症状。该研究为南瓜抗病育种提供了重要理论依据。
南瓜作为营养丰富的重要经济作物,其产业发展直接影响农民增收。然而白粉病(PM)的肆虐可使授粉后25天内的南瓜死亡率骤增,造成60%-70%的产量损失。现有抗病品种存在地域适应性差、果实畸形等问题,化学防治又面临农药残留难题。在这一背景下,内蒙古自治区自然科学基金项目(2025MS03003)支持的研究团队将目光投向了植物防御系统中的关键调控因子——含缬氨酸-谷氨酰胺(VQ)基序的蛋白家族。
VQ蛋白作为WRKY转录因子和MAPK蛋白的互作伙伴,在植物应对生物/非生物胁迫中发挥核心作用。前期转录组分析发现,南瓜VQ家族成员CpVQ27在白粉病感染后呈现显著差异表达:抗病材料F2中表达下调,而感病材料M3中表达上调。更引人注目的是,该团队此前在烟草中的过表达实验已证实CpVQ27会削弱植物对白粉病的抗性。这些发现促使研究人员深入探索CpVQ27调控南瓜抗病性的分子机制。
研究团队采用病毒易感品种MRJ进行瞬时过表达体系构建,通过GFP荧光检测、病毒表型观察和qPCR验证了CpVQ27的成功表达。关键技术包括:基于转录组测序的差异基因筛选、系统发育树构建及同源性分析、农杆菌介导的瞬时转化技术、胼胝质沉积检测、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量测定,以及防御相关基因表达分析。
【系统发育分析揭示进化关系】
通过构建系统发育树发现,CpVQ27与葫芦科作物如中国南瓜(Cucurbita moschata)和笋瓜(Cucurbita maxima)的VQ蛋白同源性高达95.6%和92.86%,但与已报道响应生物胁迫的其他VQ基因亲缘关系较远。
【过表达加剧病害症状】
实验组植株表现出更严重的白粉病病症:菌丝生长加速且积累量增加,病害指数显著升高。生理指标检测显示ROS和MDA含量较对照组分别增加32%和28%,而超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性下降40%以上。
【防御屏障被破坏】
关键发现是胼胝质沉积量减少65%,这与胼胝质合成酶(CalS)基因表达下调直接相关。已知胼胝质能在细胞壁形成物理屏障阻止病原体入侵,其含量降低直接削弱了植物防御能力。同时,水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)信号通路相关基因表达量下降50%-70%。
【讨论与展望】
该研究首次阐明CpVQ27通过负调控胼胝质合成和抗氧化系统来削弱南瓜对白粉病的抗性。这一发现与水稻中OsVQ14/OsVQ32通过OsMPK6-OsMPK4级联增强抗病性的机制形成鲜明对比,揭示了VQ蛋白在不同作物中可能具有截然相反的调控功能。研究人员特别指出,CpVQ27与拟南芥AtVQ22(JAV1)类似,可能通过干扰WRKY转录因子活性来抑制防御反应。
这项发表在《Journal of Plant Physiology》的研究为南瓜抗病育种提供了新思路:通过基因编辑技术敲除CpVQ27或阻断其与下游效应分子的互作,有望培育出兼具高产和广谱抗性的新品种。未来研究将聚焦于解析CpVQ27与WRKY/MAPK蛋白的精确互作网络,以及开发基于VQ蛋白调控的分子设计育种策略。
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