CHK1-S剪接变体通过调控TRA2A/B依赖性选择性剪接抑制慢性髓系白血病进展

本研究针对慢性髓系白血病(CML)中CHK1激酶剪接调控机制不明的问题，通过对比分析CHK1-S（缺失外显子3的剪接变体）与全长CHK1在正常造血组织和CML中的表达差异，发现BCR-ABL癌蛋白通过下调TRA2A/B剪接因子抑制CHK1-S表达，而恢复CHK1-S可显著抑制K562细胞增殖并阻滞G2/M期。该研究首次揭示CHK1-S作为CML抑制因子的功能，为靶向CHK1剪接变体的白血病治疗提供新策略。

　　

在肿瘤治疗领域，检查点激酶1（CHK1）犹如细胞基因组的"守护者"，通过调控DNA损伤应答和细胞周期检查点维持基因组稳定性。然而这把"双刃剑"在白血病中却被癌细胞劫持——全长CHK1促进白血病细胞增殖，而其剪接变体CHK1-S（缺失外显子3的43-kDa亚型）的功能却成谜。更棘手的是，当前CHK1抑制剂临床应用面临严重毒性问题，亟需探索更精准的调控策略。

上海交通大学医学院附属瑞金医院的研究团队在《Leukemia Research》发表的研究，首次系统揭示了CHK1-S在慢性髓系白血病（CML）中的抑癌作用。研究人员采用蛋白质印迹、流式细胞术和基因敲降等技术，通过对比野生型小鼠骨髓、CML患者样本和K562细胞模型，发现BCR-ABL癌蛋白通过干扰TRA2A/B剪接因子调控，特异性抑制CHK1-S表达；而恢复CHK1-S表达可显著抑制白血病细胞增殖，诱导G₂/M期阻滞。

主要技术方法
研究团队建立小鼠多组织蛋白表达谱，采用免疫印迹定量CHK1-S/CHK1比值；通过伊马替尼处理和BCR-ABL敲降实验验证致癌信号对剪接变体的调控；利用细胞周期分析和增殖实验评估CHK1-S功能；结合RNA结合蛋白筛选揭示TRA2A/B介导的选择性剪接机制。

研究结果

差异表达模式
骨髓中CHK1-S表达显著高于其他组织（CHK1-S/CHK1比值达3.2倍），而CML患者骨髓单核细胞中该比值骤降，提示CHK1-S具有造血组织特异性调控特征。

BCR-ABL的调控作用
BCR-ABL转染使CHK1-S蛋白水平降低60%，而伊马替尼处理可恢复其表达，证实该癌蛋白直接干扰CHK1剪接平衡。

功能机制解析
恢复CHK1-S使K562细胞增殖率下降45%，G₂/M期细胞比例增加2.3倍。分子机制上，剪接因子TRA2A和TRA2B被鉴定为调控CHK1外显子3跳跃的关键效应蛋白。

讨论与意义
该研究突破性地证实CHK1-S作为CHK1的内源性拮抗剂，在CML中发挥抑癌作用。这种"自我刹车"机制的发现，为开发靶向CHK1剪接变体的治疗方案提供理论依据——通过特异性上调CHK1-S或调控TRA2A/B活性，可能实现选择性抑制白血病细胞而不影响正常组织的治疗效果。研究同时揭示BCR-ABL通过重塑剪接调控网络促进白血病发生的新机制，为理解致癌信号与RNA加工的联系提供重要范式。