MTHFR基因C677T杂合突变及其启动子区甲基化改变共同增加血栓性卒中风险

埃及研究人员针对血栓性卒中风险因素开展创新研究，发现MTHFR基因C677T杂合突变与启动子区高甲基化协同作用，导致同型半胱氨酸（homocysteine）水平升高和维生素B12缺乏，为卒中防治提供新靶点。该成果发表于《Journal of Molecular Neuroscience》。

　　

在全球范围内，卒中已成为仅次于心血管疾病的第二大死亡原因，其中缺血性卒中占比高达85%。尽管传统危险因素如高血压、动脉粥样硬化已被广泛认知，但越来越多的证据表明，遗传变异和表观遗传调控在卒中发病机制中扮演关键角色。特别是在埃及等发展中国家，卒中发病率持续攀升，但相关分子机制研究仍存在空白。这促使科学家们开始探索基因-环境交互作用对卒中发生的影响。

埃及萨达特大学分子生物学研究所（Department of Molecular Biology, Genetic Engineering and Biotechnology Research Institute, University of Sadat City）的Ahmed M. Zain团队开展了一项开创性研究。他们发现甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因的C677T杂合突变与启动子区异常高甲基化形成"双重打击"，通过干扰同型半胱氨酸代谢途径，显著增加血栓性卒中风险。这项重要发现发表在《Journal of Molecular Neuroscience》上，为卒中预防和个体化治疗提供了新思路。

研究团队采用三大关键技术：1）TaqMan^TM SNP分型技术检测FV、FII和MTHFR基因的6个SNP位点；2）亚硫酸氢盐转化结合qRT-PCR定量分析启动子区甲基化水平；3）甲基化依赖性限制酶MspJI消化验证特定基因位点的甲基化状态。研究对象为100例埃及血栓性卒中患者和100例年龄匹配的健康对照。

生化标志物分析

通过ELISA和生化检测发现，卒中组同型半胱氨酸水平显著升高（25±1 μmol/L vs 对照13.5 μmol/L），同时伴随维生素B₁₂（90±15 pg/mL）和叶酸（1.5±0.5 ng/mL）水平降低。低密度脂蛋白（LDL>70 mg/dL）异常率达95%，提示代谢紊乱与卒中发生密切相关。

SNP分布特征

基因分型显示MTHFR C677T杂合突变在卒中组检出率高达95%，而其他5个SNP（FV R506Q/H1299R/Y1702C和FII G20210A）突变率不足5%。Hardy-Weinberg平衡检验证实C677T等位基因频率差异具有统计学意义（χ²=7.92, P=0.005）。

甲基化模式改变

创新性采用MspJI酶切分析发现，卒中组MTHFR启动子区出现130 bp和90 bp特征性条带，提示存在高甲基化。qRT-PCR定量显示甲基化水平较对照组升高4倍（P<0.01），而FV和FII基因启动子区甲基化状态无显著变化。

这项研究首次揭示了MTHFR基因"遗传突变-表观修饰"双重机制在血栓性卒中中的作用模式。C677T突变导致酶活性降低，而启动子区高甲基化进一步抑制基因表达，共同引发同型半胱氨酸代谢障碍和维生素B₁₂缺乏，最终促进血栓形成。该发现不仅解释了埃及人群卒中高发的部分分子基础，更重要的是为临床提供了新的生物标志物组合（MTHFR基因型+甲基化状态+同型半胱氨酸水平），对实现卒中精准预防具有重要价值。未来研究可进一步探索去甲基化干预是否能够逆转这一病理过程，为卒中治疗开辟新途径。