调控血小板介导的先天异物反应优化原位血管组织工程效果

本研究针对组织工程血管移植物(TEVG)植入后易发生狭窄的问题，通过揭示Lyst基因调控的血小板密集颗粒分泌机制，发现P2Y12拮抗剂普拉格雷可有效抑制ADP介导的持续血小板聚集，显著降低75%的狭窄发生率，为开发"即用型"血管移植物提供了新策略。

　　

在心血管疾病治疗领域，组织工程血管移植物(TEVG)的临床应用面临一个关键瓶颈——高达75%的植入患者会出现血管狭窄。这种狭窄并非传统意义上的机械阻塞，而是由宿主对移植物的异物反应引发的异常组织重塑。更令人困惑的是，这种狭窄现象在具有生长能力的临床TEVG中尤为突出，迫使患者不得不接受球囊血管成形术等二次干预。

美国全国儿童医院(Nationwide Children's Hospital)的研究团队通过一系列精巧实验，揭示了血小板Lyst基因介导的先天免疫信号是驱动TEVG狭窄的关键机制。研究发现，Lyst突变会选择性破坏血小板密集颗粒(dense granule)的胞吐作用，抑制ADP等促聚集因子的释放，从而阻断持续血小板聚集导致的管腔闭塞。基于这一发现，使用P2Y12受体拮抗剂普拉格雷(prasugrel)进行干预，可模拟Lyst突变体的血小板功能缺陷，在不影响血管新生的情况下实现100%的移植物通畅率。该突破性成果发表于《npj Regenerative Medicine》，为开发免细胞种植的"即用型"TEVG提供了理论依据。

研究团队采用多学科交叉的研究方法：通过CRISPR/Cas9技术构建细胞特异性Lyst突变小鼠模型；建立骨髓移植模型验证骨髓源性细胞的调控作用；利用微型CT和超声进行动态监测；采用流式细胞术分析血小板αIIbβ₃整合素和P-选择素表达；通过光透射聚集仪测定血小板聚集功能；结合扫描电镜观察移植物表面血小板沉积形态。

Lyst突变预防小口径TEVG狭窄
通过比较野生型(WT)和全身性Lyst突变小鼠的TEVG植入效果，Micro-CT显示突变组92%移植物保持通畅，而WT组仅25%。组织学证实Lyst突变体形成的血栓更薄且有序，最终重塑为正常血管结构。

TEVG狭窄/闭塞是由Lyst介导的血小板功能启动的多阶段过程
骨髓移植实验证实狭窄源于骨髓源性细胞。通过构建巨噬细胞、中性粒细胞和血小板特异性Lyst突变体，发现仅血小板特异性突变能重现全身性突变的效果，96.7%移植物保持通畅，且血小板计数正常。

Lyst突变血小板可粘附生物材料但无法有效释放密集颗粒内容物
流式分析显示Lyst突变不影响α颗粒释放(P-选择素表达)和整合素αIIbβ₃激活。聚集实验揭示突变体对凝血酶和ADP反应正常，但对胶原诱导的聚集显著减弱，伴随ATP释放缺陷。电镜观察到突变体血小板形成更规则的单层沉积。

普拉格雷通过抑制P2Y12受体阻断ADP介导的血小板信号传导
P2Y12敲除小鼠和普拉格雷处理的WT小鼠均实现100%通畅率。值得注意的是，药理干预仅阻断持续聚集而不影响初期粘附，保留了形成临时基质引导血管新生的关键功能。

这项研究阐明了血小板在TEVG异物反应中的核心作用：通过Lyst依赖的密集颗粒释放机制，ADP-P2Y12信号轴放大了血小板聚集，形成过度增生的临时基质并最终重塑为狭窄组织。该发现具有双重意义：一方面，普拉格雷的干预效果支持将其纳入临床方案；另一方面，揭示的血小板"选择性调控"策略——即抑制持续聚集而保留初期粘附——为设计新一代智能生物材料提供了方向。特别值得注意的是，该研究建立的"免疫-力学"互作模型不仅适用于血管再生，对骨、软组织等其它组织工程领域同样具有启示价值。