马铃薯转录因子StMYB96的克隆及功能研究

　　

摘要：

目的 MYB转录因子通过调控逆境响应基因，在植物抵御非生物胁迫中发挥着重要作用。旨在探究马铃薯转录因子StMYB96在响应非生物胁迫中的功能。 方法 克隆StMYB96基因，对其进行生物信息学分析、亚细胞定位和表达模式分析。通过体外表达StMYB96并结合DNA亲和纯化测序技术（DNA affinity purification sequencing, DAP-seq），在全基因组范围内鉴定StMYB96的靶基因及其参与的非生物胁迫响应途径。 结果 StMYB96的开放阅读框为1 002 bp，编码333个氨基酸。多序列比对结果显示，StMYB96与番茄（Solanum lycopersicum）SlMYB306、辣椒（Capsicum annuum）CaMYB306和枸杞（Lycium barbarum）LbMYB306的亲缘关系较近。亚细胞定位结果表明，StMYB96定位于细胞核中。RT-qPCR分析显示，StMYB96在马铃薯幼苗的根、茎和叶中均有表达，其中，在茎中表达量最高。在模拟干旱胁迫下，StMYB96的表达量显著上调；而在低温处理下，其表达量持续下调。通过DAP-seq技术，鉴定出StMYB96的3个结合位点，在全基因组范围内鉴定到8 837个靶基因，其启动子区域包含StMYB96的结合位点，这些靶基因广泛参与多种代谢途径。其中，类黄酮生物合成途径相关基因和脂肪酸延伸途径相关基因均受StMYB96直接调控。 结论 StMYB96可能通过调控不同的代谢途径参与马铃薯对干旱和低温胁迫的响应。