基于结核分枝杆菌游离DNA的多靶点实时PCR技术在眼结核诊断中的创新性评估

来自印度的研究人员针对眼结核(OTB)诊断难题，开发了基于玻璃体液(VF)中结核分枝杆菌游离DNA(CF-DNA)的多靶点实时PCR(Mrt-PCR)技术。该研究对比了Mrt-PCR(靶向IS6110/IS1081/nrdZ基因)、Truenat MTB plus和GeneXpert MTB/RIF Ultra(Xpert Ultra)三种方法，在50例样本中分别实现76%、64%和56%的检出率，证实CF-DNA-Mrt-PCR具有更高敏感性，为OTB早期诊断提供了新策略。

　　

在印度这个眼结核(OTB)高发地区，视力丧失的防治亟需快速精准的诊断手段。这项开创性研究另辟蹊径，瞄准玻璃体液(VF)中自由漂浮的结核分枝杆菌遗传物质——细胞游离DNA(CF-DNA)，构建了同时靶向IS6110、IS1081和nrdZ三个基因的多重实时荧光定量PCR(Mrt-PCR)检测体系。

研究团队对50份临床样本展开技术对决：2例确诊OTB、22例疑似病例和25例对照。结果显示，CF-DNA-Mrt-PCR以76%(19/25)的检出率碾压Truenat MTB plus(64%)和Xpert Ultra(56%)，更有趣的是，不同靶基因各显神通——IS1081单独捕获3例、IS6110锁定2例、nrdZ擒获1例。针对利福平耐药性检测，Truenat和Xpert Ultra发现的3例耐药经rpoB基因测序完美验证。

该研究不仅证实CF-DNA如同"分子雷达"能显著提升OTB诊断灵敏度，其多靶点设计更如同"三保险"机制，为抗击这个致盲性顽疾提供了全新的分子武器库。