外源性生成淋巴祖细胞兼具T细胞与先天淋巴样细胞分化潜能：DLL4平台在免疫重建治疗中的突破性进展

本研究通过单细胞RNA测序和质谱流式技术，首次系统揭示了基于Delta样配体4（DLL4）的无饲养层培养体系生成的淋巴祖细胞（ProTcells）具有T细胞与先天淋巴样细胞（ILC/NK）双重分化潜能。研究发现CD7+祖细胞群体中存在CD5+（T系）和CD161+（ILC系）两条发育轨迹，并证实转录因子BCL11B在抑制髓系分化同时保留NK潜能的调控新机制，为造血干细胞移植（HSCT）后免疫重建提供了创新治疗策略。

　　

外源性生成淋巴祖细胞的双重命运图谱

引言：DLL4平台构建的淋巴分化模型
通过将CD34⁺造血干细胞与固定化DLL4及细胞因子共培养7天，研究团队建立了可稳定生成CD7⁺淋巴祖细胞的标准化平台。早期研究已证实这些祖细胞能加速胸腺移植后的T细胞重建，但其分子特征和异质性尚未阐明。

方法：多组学解析细胞异质性
采用单细胞转录组测序（scRNAseq）和质谱流式（CyTOF）对脐带血（CB）与动员外周血（mPB）来源的祖细胞进行联合分析。数据整合后，40,048个细胞被划分为14个亚群，其中80%表达T系早期标志CD7。

结果：胸腺早期发育的体外重现
UMAP降维分析显示CD7⁺细胞形成7个亚群：

• 簇0：高表达细胞周期基因（CDK1、MKI67），处于淋巴定向早期
• 簇1-3：上调NOTCH通路基因（NRARP）和T系转录因子（TCF7、BCL11B）
• 簇3：富集胸腺归巢分子（CXCR4、ITGA4），提示更成熟状态
• 簇5：活跃增殖的过渡态细胞

与人类胸腺细胞数据库比对发现，这些细胞与双阴性（DN1/DN2）阶段胸腺细胞高度相似，证实其生理相关性。

ILC/NK潜能的分子证据
关键发现是簇4/6特异性表达：

• ILC标志：KLRB1（CD161）、ID2、NFIL3、KIT
• NK效应分子：GZMA、PRF1、NCAM1（CD56）
  伪时序分析揭示两条发育轨迹：L1（T系）高表达NOTCH靶基因，L2（ILC系）富集ITGB7等迁移分子。

功能验证：命运可塑性与临床潜力
通过分选CD161⁺与CD161^-群体发现：

• 二者在IL15培养中均能分化为CD56⁺ NK细胞
• OP9-DLL1体系下均可生成TCRαβ⁺ T细胞，但CD161^-组效率更高
• 新生NSG小鼠模型中，两组均实现胸腺定植

BCL11B的调控新机制
利用报告基因hESC模型揭示：

• BCL11B⁺祖细胞保留NK分化能力但丧失髓系潜能
• 单等位基因失活导致DP细胞生成障碍，提示剂量依赖性调控

讨论：治疗前景与科学启示
该研究突破性地揭示：

1. DLL4平台模拟了胸腺内T/ILC双潜能前体的发育环境
2. CD161⁺群体可能代表人类胸腺内NK前体细胞
3. BCL11B通过"髓系刹车"机制维持淋系定向，为免疫缺陷（如22q11.2缺失综合征）提供治疗靶点

目前该平台已进入I/II期临床试验，未来或可通过微环境调控定向生成特定淋巴亚群，为癌症、感染及衰老相关免疫功能障碍提供精准治疗方案。