TB47联合氯法齐明治疗麻风分枝杆菌感染的体外及体内疗效评估：靶向电子传递链的新型治疗策略

这篇研究首次证实TB47（靶向细胞色素bc1-aa3超复合体的QcrB抑制剂）与氯法齐明（CFZ）联用对麻风分枝杆菌（M. leprae）具有剂量依赖性杀菌效应。通过IDE8蜱细胞体外模型和BALB/c小鼠体内实验，发现每周给药方案中，TB47（100/10 mg/kg）联合CFZ（5 mg/kg）在治疗终点（T1）和210天后（T3）均实现细菌清除，而单药仅显示抑菌作用。该组合通过破坏电子传递链（ETC）和增强活性氧（ROS）产生，为缩短麻风病疗程提供新思路。

　　

ABSTRACT
麻风病由麻风分枝杆菌（M. leprae）和麻风杆菌（M. lepromatosis）引起，现行多药联合疗法（MDT）疗程长达6-12个月且存在耐药问题。本研究聚焦新型QcrB抑制剂TB47，该化合物通过阻断细胞色素bc1-aa3超复合体中的电子传递，干扰细菌ATP合成。体外实验采用感染M. leprae的IDE8蜱细胞系，5 ng/mL TB47处理30天即可显著抑制细菌增殖。体内研究通过Sheppard模型发现，每周给予BALB/c小鼠TB47（100/10 mg/kg）联合CFZ（5 mg/kg）的方案在治疗后210天仍保持杀菌效果，而CFZ单药组直至210天才显现类似作用。组织病理学分析进一步验证了联合治疗的持久抗菌活性。

INTRODUCTION
2023年全球新增麻风病例182,815例，79.3%集中在印度、巴西和印尼。现行MDT方案（氨苯砜/氯法齐明/利福平）面临疗程长和耐药挑战。靶向氧化磷酸化（OXPHOS）的药物如结核病用药贝达喹啉已证实对M. leprae有效。TB47作为Q203的结构类似物，特异性抑制细胞色素b亚基QcrB，阻断甲基萘醌介导的电子传递。值得注意的是，M. leprae缺乏细胞色素bd氧化酶基因，使其对QcrB抑制剂高度敏感。CFZ可通过竞争性消耗甲基萘醌库，与TB47产生协同杀菌效应。

MATERIALS AND METHODS
实验采用M. leprae Thai 53株，体外模型使用IDE8细胞系（感染复数MOI=50），通过齐尼氏染色计数菌量。体内研究将10⁴菌量接种小鼠足垫，治疗组每周接受TB47（1-100 mg/kg）±CFZ（5 mg/kg）灌胃，持续90天。分别在治疗结束（T1）、120天后（T2）和210天后（T3）评估足垫菌载量。采用Collins法提取核酸，通过hsp18和esxA基因表达评估细菌活性。

RESULTS
体外数据显示，5 ng/mL TB47处理使IDE8细胞内菌量从10⁷降至检测限（4.38×10³ AFB/mL）。体内实验中，TB47+CFZ组在T1时9/15小鼠达到菌量检测限（<4×10³/足垫），显著优于单药组。组织病理显示，TB47 100 mg/kg+CFZ组在所有时间点Fite-Faraco染色均为阴性，而单用CFZ组直至T3才出现1/5转阴。值得注意的是，TB47 1 mg/kg+CFZ组也表现出全时间点杀菌效应。

DISCUSSION
研究首次揭示TB47-CFZ组合对M. leprae的剂量依赖性杀菌作用。虽然TB47单药仅表现抑菌活性（可能与每周给药间隔有关），但其与CFZ联用可加速细菌清除。CFZ的累积效应解释了单药组延迟杀菌现象——其在巨噬细胞内的蓄积导致持续抗菌压力。该发现为优化麻风治疗方案提供重要依据：①针对ETC靶点的药物可缩短疗程；②CFZ的协同作用可能通过耗尽甲基萘醌库和增加ROS实现。研究局限性包括无法进行体外培养和部分样本核酸检测灵敏度不足，但组织学结果强力支持联合治疗的临床转化潜力。计划2025年启动的结核病临床试验将为此提供更多参考。