基于粪便免疫化学检测、M3基因、KRAS突变和肿瘤甲基化负荷组合策略的结直肠癌诊断准确性评估

本研究通过多中心临床数据，创新性评估了粪便免疫化学检测(FIT)、M3基因表达、KRAS突变和血液甲基化负荷在结直肠癌(CRC)诊断中的组合价值。研究发现KRAS/M3/甲基化三指标联合模型对早期CRC诊断最具潜力(AUC达0.931)，其性能媲美四指标联合且优于传统FIT检测，为无创CRC筛查提供了优化方案。

　　

结直肠癌作为全球第三大高发恶性肿瘤，其早期诊断面临重大挑战。传统结肠镜检查虽为金标准，但存在侵入性高、依从性差等局限。这项多中心研究创新性地系统评估了四种非侵入性标志物的诊断效能，为临床筛查提供了重要循证依据。

2 Materials and methods
研究纳入北京电力医院等三家医疗机构的197例患者，通过G-power分析确定样本量。采用qRT-PCR检测粪便M3基因表达（引物序列：5’-AATGGGAATGGAGCGGATTC-3’/5’-CCTGCACCAGCTTATCGTCAA-3’），以△CT值<15.22定义为高表达。KRAS突变检测涵盖Gly12/13常见位点，甲基化检测针对SDC2基因启动子区。所有数据采用SPSS 23进行ROC曲线分析。

3 Results
单因素分析显示M3基因诊断效能最优（总AUC 0.824），显著高于FIT（AUC 0.59）和KRAS突变（AUC 0.643）。甲基化负荷表现居中（AUC 0.778）。双指标组合中，M3+甲基化联盟表现突出（AUC 0.903），较单指标提升9.7%。三指标组合揭示KRAS/M3/甲基化模型诊断效能飞跃（总AUC 0.920），对早期CRC识别能力尤为显著（AUC 0.931）。值得注意的是，四指标联合并未带来额外增益，提示FIT在优化模型中贡献有限。

4 Discussion
该研究首次证实微生物标记M3基因与表观遗传学指标甲基化负荷、基因突变KRAS的协同效应。M3基因来自Lachnoclostridium菌属，其丰度与CRC发生显著相关；而甲基化改变作为表观遗传标志，与KRAS突变形成互补检测维度。这种"微生物-基因突变-表观修饰"三位一体检测策略，较现行FDA批准的Cologuard检测方案更具靶向性。

5 Conclusion
研究确立了KRAS⁺/M3^high/甲基化⁺三联检测作为早期CRC筛查的最优组合，其诊断效能媲美结肠镜但更具无创优势。该发现为开发新一代CRC筛查试剂盒提供了关键理论依据，特别适用于大规模人群筛查场景。未来需通过前瞻性队列验证该模型的临床转化价值。