体外转录SGK1-mRNA优化策略：治疗女性不孕症的新型基因治疗工具

本研究针对女性不孕症中子宫内膜容受性调控难题，创新性采用体外转录(IVT)-mRNA技术靶向调控血清-和糖皮质激素调节激酶1(SGK1)。研究人员通过构建SGK1野生型(SGK1WT)、组成型激活(SGK1S422D)和失活突变体(SGK1K127A)，在子宫内膜细胞模型中证实IVT-mRNA转染效率达97.6%，显著高于传统质粒DNA，并能精准调控上皮钠通道(ENaC)表达，为开发非激素类生育调节方案提供新思路。

　　

在全球范围内，约10-15%的育龄夫妇面临不孕困扰，其中女性因素占重要比例。随着晚婚晚育趋势加剧，年龄相关不孕(AMA)问题日益突出。虽然辅助生殖技术如体外受精(IVF)能部分解决卵子质量问题，但子宫内膜容受性不足导致的植入失败仍是临床瓶颈。既往研究发现，血清-和糖皮质激素调节激酶1(SGK1)在子宫内膜异常高表达与不孕密切相关，该激酶通过调控上皮钠通道(ENaC)影响子宫液环境，可能导致子宫"过早关闭"而阻碍胚胎植入。传统基因治疗方法如质粒DNA或病毒载体存在转染效率低、免疫原性风险等问题，亟需开发更安全高效的干预策略。

德国蒂宾根大学医院(University Hospital Tubingen)的Itishri Sahu等研究人员在《BMC Research Notes》发表创新研究，探索利用COVID-19疫苗中验证过的体外转录mRNA(IVT-mRNA)技术调控SGK1表达。这项研究通过三种关键技术方法实现突破：首先采用T7高产量RNA合成系统制备带5'端抗反向帽类似物(ARCA)的IVT-mRNA；其次运用流式细胞术定量比较转染效率；最后通过Western blot和定量PCR分析SGK1及其下游靶点ENaC的蛋白与转录水平变化。

研究结果部分，转染效率分析显示，IVT-mRNA在人胚肾HEK293细胞中达到97.6%转染率，较传统质粒DNA(45.2%)提高2.5倍。在子宫内膜石川细胞模型中，组成型激活突变体SGK1_S422D使SGK1转录水平提升5倍，蛋白表达增加4倍；而激酶失活突变体SGK1_K127A则显著降低SGK1表达。值得注意的是，ENaC蛋白表达呈现相同趋势，SGK1_S422D处理使ENaC水平升高5倍，证实SGK1-ENaC信号轴的可控性。

讨论部分强调，该研究首次证明IVT-mRNA技术在生殖医学中的应用潜力。相较于传统基因递送系统，IVT-mRNA具有三大优势：细胞质直接表达避免核膜屏障；瞬时表达特性降低基因组整合风险；模块化设计便于快速优化。研究人员提出双重应用前景：在辅助生殖中，胚胎移植前使用SGK1抑制剂改善子宫内膜容受性；在避孕领域，开发基于SGK1激活剂的非激素类避孕方案。虽然目前研究限于体外模型，但为后续开发子宫腔局部给药的mRNA疗法奠定基础，未来需在动物模型中验证其安全性和有效性。

这项研究的意义在于开辟了基因治疗新路径，通过精确调控子宫内膜SGK1/ENaC平衡，有望解决植入失败这一生殖医学难题。随着mRNA递送技术和修饰工艺的进步，该平台可扩展应用于其他生殖系统疾病，为个性化生育调控提供全新工具。