基于交叉引物扩增技术的EasyNAT CT/NG检测试剂盒在沙眼衣原体和淋病奈瑟菌快速诊断中的应用与评价

本研究针对沙眼衣原体(CT)和淋病奈瑟菌(NG)感染诊断时效性不足的临床痛点，开发了基于交叉引物扩增(CPA)技术的EasyNAT CT/NG快速检测系统。该研究通过198例临床样本验证显示，与实时荧光PCR相比，该方法对CT和NG的总体符合率分别达98.5%和99.0%，检测限低至400拷贝/mL，30分钟即可完成检测，为性传播感染(STI)的即时检测(POCT)提供了高效解决方案。

　　

性传播感染(STI)已成为全球公共卫生的重大挑战，其中沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis, CT)和淋病奈瑟菌(Neisseria gonorrhoeae, NG)是最常见的病原体。据世界卫生组织统计，2020年全球新增CT感染1.29亿例、NG感染8200万例。这些感染往往无症状，易导致慢性并发症如盆腔炎、不孕症等，而NG日益严重的抗生素耐药性更使防治雪上加霜。传统培养法灵敏度低，核酸检测(NAATs)虽准确但依赖昂贵设备，难以在基层推广。

针对这一困境，温州医科大学附属第一医院检验医学中心的研究团队开发了基于交叉引物扩增(Cross-Priming Amplification, CPA)技术的EasyNAT CT/NG检测系统。这项发表在《European Journal of Clinical Microbiology》的研究证实，该技术可在30分钟内完成检测，灵敏度达400拷贝/mL，对18种常见生殖道病原体无交叉反应，完全满足即时检测需求。

研究采用三种关键技术：1) 以198例临床样本（含尿液、宫颈拭子等）进行方法学比对；2) 通过梯度稀释质粒测定检测限；3) 参照WHO目标产品特征(TPPs)评估POCT适用性。

临床性能评估
在198例样本中，EasyNAT与实时PCR对CT/NG的阳性符合率均达100%，总体符合率分别为98.5%和99.0%。值得注意的是，1例浑浊尿液样本被实时PCR漏检但被EasyNAT检出，证实其对复杂样本的耐受性。但严重溶血样本可能出现无效结果。

灵敏度与特异性
检测下限为400拷贝/mL（95%CI: CT 322.18-1347.66，NG 319.21-3256.34）。特异性测试显示，与HPV18、HSV-II等18种病原体无交叉反应。

POCT适用性
虽部分满足TPPs标准（如30分钟出结果、操作简便），但检测成本（9-10美元）略高于WHO推荐的5美元标准，且未整合耐药基因检测功能。

该研究的突破性在于：首次将CPA技术应用于CT/NG联合检测，通过全封闭卡匣设计实现"样本进-结果出"的自动化流程。其临床价值体现在三方面：1) 为基层医疗提供可靠的快速诊断工具；2) 非侵入性尿液检测适合筛查；3) 紧凑型设备便于资源有限地区使用。未来改进方向包括降低成本、扩展耐药检测模块，这将为STI防控提供更强大的技术支撑。