靶向P53/Bax通路的新型纳米颗粒RGD-MSN/QR/shTERT联合槲皮素与TERT沉默协同治疗卵巢癌的机制与疗效研究

本研究针对卵巢癌(OC)治疗中槲皮素(QR)单独使用无法诱导凋亡的难题，通过网络药理学和蛋白质组学发现TERT过度结合P53是关键机制。研究人员设计RGD-MSN/QR/shTERT纳米颗粒实现QR与shTERT共递送，证实其通过激活P53/Bax通路显著抑制肿瘤生长（体内抑制率提升40%），为OC靶向治疗提供新策略。

　　

卵巢癌作为妇科恶性肿瘤中致死率最高的癌种，当前临床治疗面临三大困境：铂类化疗耐药率高（>50%复发）、靶向药物选择有限、晚期患者5年生存率不足30%。更棘手的是，天然化合物槲皮素(Quercetin, QR)虽在多种癌症中展现抑瘤潜力，但在卵巢癌中仅能阻滞细胞周期而无法诱导凋亡，这一反常现象背后的机制长期未明。

南京医科大学附属泰州人民医院临床实验室的研究团队在《Journal of Nanobiotechnology》发表突破性研究，首次揭示TERT-P53异常结合是阻碍QR疗效的关键，并创新性开发RGD肽修饰的介孔二氧化硅纳米颗粒(RGD-MSN)，实现QR与TERT短发夹RNA(shTERT)的协同递送。该研究通过TCGA-OV数据库分析结合蛋白质组学，发现OC中TERT与P53存在显著共表达(r=0.68)，CO-IP实验证实两者直接结合。当shTERT解除TERT对P53的束缚后，QR通过分子对接稳定P53蛋白(结合能-8.9 kcal/mol)，激活下游BAX表达，使凋亡率提升3.2倍。体内实验显示，RGD-MSN/QR/shTERT纳米颗粒通过αvβ3整合素靶向蓄积于肿瘤部位，载药量达55.8%(QR)和92.3%(shTERT)，使SKOV-3移植瘤体积缩小67%（p<0.001），且血清ALT/AST等指标证实其生物安全性。

关键技术方法包括：1) 网络药理学筛选QR-OC作用靶点；2) 基于TCGA-OV和蛋白质组学(4D-LFQ)分析TERT-P53互作；3) MSN纳米载体合成与RGD-PEG表面修饰；4) 皮下移植瘤模型评估体内疗效；5) IHC/WB检测P53/Bax通路蛋白表达。

主要研究结果

QR抑制OC细胞周期但无法诱导凋亡
CCK-8和流式细胞术显示，10μM QR使ES-2细胞G0/G1期阻滞增加1.8倍(p<0.001)，但凋亡率无显著变化。分子对接发现QR与P21(CDKN1A)结合能达-7.5 kcal/mol，Western blot证实P21上调而BAX未激活。

TERT-P53互作阻碍QR效应
CO-IP实验检测到OC细胞中TERT-P53复合物。shTERT转染后，QR使P53蛋白水平升高2.3倍，BAX/Bcl-2比值提升4.1倍(p<0.001)，凋亡率从8.7%增至28.1%。

纳米颗粒实现协同增效
RGD-MSN/QR/shTERT粒径239.5 nm（PDI<0.2），12小时内缓释QR 68%。荷瘤小鼠模型中，纳米治疗组肿瘤抑制率显著高于游离药物组(59.4% vs 32.1%, p=0.008)，IHC显示P53阳性细胞比例达71.3%。

这项研究不仅阐明TERT-P53互作是OC治疗新靶点，更开创了"解除抑制-激活通路"的联合治疗范式。RGD-MSN/QR/shTERT纳米平台克服了QR生物利用度低(6.7%)和shRNA易降解的瓶颈，为临床转化提供可能。未来可拓展至其他P53突变型癌症，或与PARP抑制剂等联用增强疗效。