TRPV4缺失在脊髓挫伤模型中不足以促进修复：聚焦小胶质细胞特异性作用的机制探索

本研究针对脊髓损伤(SCI)后小胶质细胞过度激活加剧继发性损伤的问题，通过构建吞噬细胞特异性Trpv4条件敲除小鼠和骨髓嵌合体模型，探究TRPV4离子通道在SCI修复中的作用。意外发现TRPV4缺失未能改善功能恢复或减少胶质瘢痕形成，提示其作用具有通路冗余性，为SCI治疗靶点选择提供了新视角。

　　

脊髓损伤后神经修复的困境与突破

当脊髓遭受创伤性损伤时，小胶质细胞作为中枢神经系统的第一道免疫防线，其反应犹如一把双刃剑。这些细胞既能通过清除细胞碎片、分泌神经营养因子发挥保护作用，又会因过度增殖和持续促炎激活加重继发性损伤。近年研究发现，瞬时受体电位香草酸4通道(TRPV4)作为机械-热-渗透压敏感的多模式传感器，在小胶质细胞迁移、形态动态和细胞骨架重构中起关键作用。更引人注目的是，先前研究显示TRPV4组成性缺失可减轻脊髓压缩损伤后的炎症反应并改善功能恢复，但该通道在特定细胞类型（尤其是小胶质细胞）中的精确作用仍属未知。

比利时哈塞尔特大学生物医学研究所（Hasselt University, Biomedical Research Institute）的Melanie Mertens团队在《Scientific Reports》发表的研究，通过两种精密的基因工程模型——他莫昔芬诱导的CX3CR1-CreER^/+介导的吞噬细胞特异性Trpv4条件敲除小鼠，以及结合PLX5622（CSF1R抑制剂）处理的骨髓嵌合体，首次系统评估了TRPV4在脊髓损伤修复中的细胞特异性贡献。令人意外的是，尽管TRPV4已知可调控小胶质细胞的Ca²⁺信号传导和机械敏感性，但特异性敲除吞噬细胞中的TRPV4既未改善运动功能恢复（Basso Mouse Scale评分），也未减少IBA-1⁺吞噬细胞的聚集或胶质瘢痕形成。更颠覆性的是，研究团队在Trpv4全敲除模型中同样未观察到保护效应，这与先前报道形成鲜明对比。

关键技术方法包括：1）构建他莫昔芬诱导的Trpv4^lox/loxCx3cr1^CreER/+条件敲除小鼠；2）建立四种骨髓嵌合体模型（野生型→野生型、KO→野生型、KO→KO、野生型→KO）；3）采用无限地平线冲击器实施T8节段85kdyn挫伤；4）通过GFP/IBA-1双标成像量化骨髓源性细胞脊髓定植率（>90%）；5）多时间点（3/7/28 dpi）组织学分析胶质瘢痕（GFAP）、髓鞘损伤（MBP）和纤维化（层粘连蛋白）。

研究结果揭示：

吞噬细胞特异性Trpv4条件敲除未能改善挫伤性SCI后的功能恢复
通过BMS评分系统监测28天，Trpv4 cKO组与对照组均从0-1分（无/轻微踝关节运动）恢复至3分（足底着地伴/不伴负重），无统计学差异。

脊髓移植的TRPV4缺陷吞噬细胞不改变挫伤结局
骨髓嵌合体模型显示，无论供体或受体TRPV4状态如何，7dpi时各组BMS评分均为1-2分（轻微/显著踝运动），且损伤周边吞噬细胞密度无差异。

TRPV4全敲除不改变功能恢复与瘢痕形成
Trpv4 KO Cx3cr1^eGFP/+小鼠在28dpi时MBP（髓鞘碱性蛋白）缺损体积、层粘连蛋白沉积和GFAP⁺星形胶质细胞密度与野生型相当。

这项研究的重要启示在于：TRPV4在SCI修复中的作用可能被其信号通路冗余性所掩盖，或受损伤模型差异（挫伤vs压缩）的影响。尽管否定了TRPV4作为单一治疗靶点的潜力，但为理解小胶质细胞调控的复杂性提供了新证据。特别值得注意的是，骨髓源性细胞成功定植脊髓并获得小胶质样表型的技术路线，为后续细胞替代治疗研究提供了方法学参考。研究者建议未来应探索TRPV4与其他机械敏感通道（如Piezo1）的协同作用，并考虑时空特异性调控策略以规避全身敲除的补偿效应。