辣椒CaMATE基因家族鉴定及CaMATE27调控辣椒素积累的功能解析

【字体: 时间:2025年07月25日 来源:Plant Science 4.2

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  本研究针对辣椒素(CAP)运输积累机制不明的问题,通过全基因组鉴定辣椒多药和有毒化合物外排(MATE)基因家族,发现52个CaMATE基因具有药物/离子转运功能。研究人员结合生物信息学分析、表达谱验证及病毒诱导基因沉默(VIGS)技术,首次揭示CaMATE27通过调控胎盘组织辣椒素和二氢辣椒素(DhCAP)积累影响辣味形成,为辣椒品质改良提供新靶点。

  

辣椒作为全球广泛种植的经济作物,其特有的辣味物质辣椒素(CAP)不仅是调味的关键成分,更具有镇痛、抗肿瘤和调节代谢等重要药用价值。然而,这种具有8-甲基6-壬烯酰胺结构的次级代谢物如何在辣椒果实中运输和积累,一直是植物代谢研究的未解之谜。近年来,多药和有毒化合物外排(Multidrug and Toxic Compound Extrusion, MATE)转运蛋白家族被发现在植物次级代谢产物转运中发挥关键作用,但该家族在辣椒素调控网络中的功能仍属空白。

广东省植物分子育种重点实验室的研究团队在《Plant Science》发表的研究,首次系统鉴定了辣椒CaMATE基因家族,并揭示其成员CaMATE27调控辣椒素积累的分子机制。研究人员采用BLASTP和HMMER搜索从辣椒基因组中筛选出52个含PF01554结构域的CaMATE基因,通过染色体定位、系统进化和启动子顺式元件分析揭示其功能多样性;结合RNA-seq和qRT-PCR技术锁定在胎盘中高表达的CaMATE27;最终利用病毒诱导基因沉默(VIGS)技术证实该基因对辣椒素和二氢辣椒素(DhCAP)积累的正调控作用。

主要技术方法
研究以高辣度辣椒品种'59自交系'为材料,通过生物信息学筛选获得CaMATE基因家族;采用SMART和InterProscan进行蛋白结构域验证;利用RNA-seq数据和qRT-PCR分析时空表达模式;构建VIGS载体进行基因功能验证;使用HPLC定量检测CAP和DhCAP含量变化。

研究结果

  1. CaMATE基因家族鉴定与进化分析:52个CaMATE蛋白均含12个跨膜结构域(TMs),系统进化分为4个亚家族,染色体定位显示串联重复事件驱动家族扩张。
  2. 功能预测与调控网络:启动子分析发现大量激素(ABA、SA)和胁迫响应元件,GO注释显示主要参与药物/离子转运。
  3. 组织特异性表达:RNA-seq显示CaMATE27在花后35天(35 DPA)胎盘组织表达量最高,较其他部位上调4-7倍。
  4. 基因功能验证:VIGS沉默CaMATE27导致胎盘CAP含量降低42.7%,DhCAP减少38.9%,证实其转运功能。

结论与意义
该研究首次建立辣椒CaMATE基因家族的系统功能框架,揭示CaMATE27通过调控辣椒素类物质转运影响果实辣味形成。这不仅完善了植物MATE转运蛋白的生物学认知,更为分子设计育种提供了重要靶点——通过调控CaMATE27表达可能实现辣椒素含量的精准调控,这对提升辣椒药用价值和风味品质具有双重意义。研究还发现该家族成员可能响应ABA和SA信号通路,为解析植物防御反应与次生代谢偶联机制开辟了新视角。

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