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基于DNA片段化策略的SYBR Green I适配体生物传感器在阿霉素监测中的创新应用
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年07月25日 来源:Talanta 5.6
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针对阿霉素(DOX)环境污染监测需求,研究人员开发了一种基于SYBR Green I(SG I)的无标记荧光适配体生物传感器(FAB)。通过将41-mer互补链(CP)片段化为三个11-mer片段,显著降低非特异性SG I结合干扰,使荧光信号比(FdsDNA/FssDNA)提升至12.6倍,检测限达1.41 nM,为环境监测提供高灵敏解决方案。
阿霉素(DOX)作为广泛使用的化疗抗生素,其环境残留问题日益严峻——能在海洋生态系统中持久存在,通过生物富集作用进入食物链,并污染农业系统。传统检测方法如高效液相色谱(HPLC)和电化学技术面临成本高、操作复杂等瓶颈。面对这一挑战,浙江理工大学的研究团队在《Talanta》发表创新成果,开发出基于DNA片段化策略的SYBR Green I(SG I)荧光适配体生物传感器(FAB),为DOX监测提供了突破性解决方案。
研究采用三项关键技术:1)将41-mer互补链(CP1)战略性地片段化为三个11-mer短链;2)利用SG I对dsDNA的特异性识别实现信号放大;3)通过DOX与SG I的竞争性结合实现背景抑制。这种设计在保持适配体(DOX1)亲和力的同时,将荧光信号比(FdsDNA/FssDNA)从4.6倍提升至12.6倍。
设计创新
通过系统优化CP片段长度,发现11-mer片段既能维持DOX1结合能力,又可最大限度减少SG I非特异性结合。凝胶电泳和熔点分析证实,片段化设计使dsDNA解链温度(Tm)保持在63.8°C,确保结构稳定性。
性能突破
竞争结合实验显示,DOX的引入产生52.8倍的荧光猝灭比(F0/F)。传感器在1.41-300 nM范围内呈线性响应,对池塘水和饮用水的加标回收率达95.1%-101.8%,相对标准偏差(RSD)<3.46%,显著优于传统方法。
结论与意义
该研究首创的DNA片段化策略,通过协同优化信号转导效率(Fmax/Fmin)与背景抑制能力(F0/F),实现了三大突破:1)检测限降低至纳摩尔级;2)免除复杂纳米材料修饰;3)抗基质干扰能力强。由Luke Wei和Jieqiong Qiu领衔的团队证明,这种模块化设计可拓展至其他靶标检测,为食品安全、环境监测领域提供了普适性技术平台。研究获得浙江理工大学基础研究基金(No.23042137-Y)等资助,相关技术已申请专利保护。
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