新型减毒土拉弗朗西斯菌ΔclpB疫苗通过皮内接种保护食蟹猴抵御气溶胶感染

针对西方缺乏获批疫苗的公共卫生威胁和潜在生物恐怖剂土拉弗朗西斯菌(Ftt)，研究人员开发了基于Ftt SCHU S4 ΔclpB减毒株的新型疫苗。通过Fischer 344大鼠和食蟹猴模型证实，单次皮内接种可提供长达1年（大鼠）和3个月（食猴）的保护，抵御高达100和500 MLD的气溶胶攻击，显著降低组织病理学和细菌负荷。该研究为临床前安全评估奠定基础，发表于《Vaccine》。

　　

土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis)是自然界中最致命的病原体之一，仅吸入10个活菌即可引发致命感染。这种被列为生物战剂的细菌，在20世纪60年代就被武器化。尽管历史上土拉菌病主要影响猎人、屠夫等职业人群，但其潜在的生物恐怖威胁始终存在。更棘手的是，西方国家至今缺乏获批疫苗，而现有候选疫苗对最危险的呼吸道感染形式保护有限。面对这一重大公共卫生挑战，美国FDA生物制品评价与研究中心（CBER）联合MRIGlobal等机构的研究团队，开发出基于Ftt SCHU S4 ΔclpB减毒株的新型疫苗，相关成果发表在《Vaccine》期刊。

研究采用Fischer 344大鼠和食蟹猴两种动物模型，通过皮内接种评估疫苗保护效果。关键技术包括：气溶胶暴露系统定量感染、器官细菌负荷检测、组织病理学评分、体温远程监测系统（Anipill）以及改良ELISA法检测血清抗体。特别采用FDA"动物规则"（Animal Rule）框架，为无法进行人体攻毒试验的疫苗评价提供科学路径。

【详细研究结果】
3.1 ΔclpB疫苗在大鼠模型中的保护特性
研究显示皮内接种10⁴-10⁸ CFU ΔclpB可使大鼠抵御65 MLD气溶胶攻击，所有接种组均存活。剂量反应实验证实10⁶ CFU剂量可抵抗高达10³ MLD（10⁴ CFU）的挑战，保护效果持续1年。值得注意的是，即便血清抗体水平较低的接种大鼠也表现出完全保护，提示细胞免疫可能起关键作用。

3.2 ΔclpB在食蟹猴中的保护效果
食蟹猴接种5.2×10⁵ CFU ΔclpB后，对500 MLD（2×10³ CFU）攻击的存活率达100%（3个月时），但1年后降至33%。病理分析显示疫苗接种显著减轻肺部病变：早期挑战组仅见局灶性化脓性肉芽肿（评分1.9），而对照组呈现广泛坏死性病变（评分4.0）。脾脏细菌负荷检测发现所有存活动物脾脏均无菌落，证实疫苗可阻断系统性感染。

【讨论与意义】
该研究首次证实Ftt来源的ΔclpB减毒株在非人灵长类模型中的保护效力。相较于传统LVS疫苗（仅43%存活率），ΔclpB在食蟹猴中展现出更优的保护效果（82%存活率）和更轻微的组织病理损伤。特别值得注意的是，疫苗诱导的抗体水平与保护效果无直接相关性，这与既往研究一致，暗示T细胞免疫的关键作用。

从转化医学角度看，该疫苗具有三大优势：①采用明确遗传背景的Ftt减毒株，避免LVS疫苗株来源不明的缺陷；②皮内接种途径便于临床实施；③冻干制剂（由Ology Bioservices生产）符合现代生产工艺要求。尽管在1年保护期上仍需优化，但研究为应对生物威胁和自然疫情提供了重要候选疫苗，也为FDA动物规则下的疫苗审批提供了范例。未来研究将聚焦免疫机制解析和临床转化，特别是探索IFN-γ等细胞因子在保护中的作用。