鼠源抗体4B1D3对SARS-CoV-2变异株的广谱交叉反应及中和活性研究

为解决SARS-CoV-2变异株导致的疫苗效力下降问题，研究人员通过杂交瘤技术开发了靶向Spike-RBD的鼠源单克隆抗体（mAbs），其中4B1D3展现出对Omicron BA.2/BA.4/5/XBB.1.5等变异株的广谱中和能力，并在小鼠模型中证实其预防效果，为COVID-19治疗提供了新策略。

　　

新型冠状病毒SARS-CoV-2自2019年底出现以来，不断进化的变异株（如Omicron）导致疫苗和抗体疗法效果减弱，全球亟需广谱抗病毒解决方案。病毒的Spike蛋白（S蛋白）及其受体结合域（RBD）是中和抗体的主要靶点，但频繁突变使得大多数抗体失效。

来自圣保罗大学（University of S?o Paulo）微生物与寄生虫学系的研究团队通过杂交瘤技术，从免疫小鼠中筛选出4种靶向SARS-CoV-2武汉株S蛋白的鼠源单克隆抗体（mAbs）。其中4B1D3表现突出：它能结合所有测试变异株（包括Omicron BA.2、BA.4/5和XBB.1.5）的RBD，并在假病毒中和实验中显示广谱抑制能力。更关键的是，单次预防性注射4B1D3可使K18-hACE2转基因小鼠免于武汉株致死攻击。这项发表于《Virology》的研究为应对变异株提供了新型武器库。

关键技术方法
研究采用三剂量免疫策略（10 μg Spike蛋白+Poly I:C佐剂），通过B细胞-骨髓瘤细胞融合构建杂交瘤，经有限稀释克隆筛选mAbs。结合免疫荧光（IFA）、ELISA和假病毒中和实验评估抗体效能，最终用K18-hACE2小鼠模型验证体内保护效果。

研究结果
1. 鼠源mAbs的开发与表征
从免疫小鼠中获得的4种mAbs（2B9F9、3E5G8、4B1D3、4H4A2）均能识别武汉株感染的细胞，但仅4B1D3对所有测试变异株的RBD保持高亲和力（图2）。

2. 中和能力分析
假病毒实验显示，4B1D3对Omicron亚系的半数抑制浓度（IC₅₀）达μg/mL级，而其他mAbs对Omicron完全失效（表1）。

3. 体内保护实验
预防性给予4B1D3（10 mg/kg）的小鼠在武汉株攻击后全部存活，且肺病毒载量显著降低（图4）。

结论与意义
该研究不仅提供了可用于诊断的mAbs工具，更发现4B1D3通过靶向保守表位实现广谱中和。尽管未解析其精确结合位点，但该抗体对当前流行株的活性已超越许多临床抗体。未来需验证其对Omicron的体内保护效果，但其"一抗多型"特性为应对未来变异株提供了模板。研究获巴西CNPq、FAPESP等机构资助，体现了国际合作在抗疫中的重要性。