基于miR-24-3p/Keap1/Nrf2通路探讨苏合香丸抗缺血性脑卒中的分子机制

本研究针对缺血性脑卒中(CIRI)治疗中脑缺血再灌注损伤这一关键临床问题，通过体内外实验首次揭示苏合香丸(ShxP)通过上调miR-24-3p表达，靶向抑制Keap1并激活Nrf2-HO-1信号通路，从而减轻神经元损伤、炎症反应和细胞凋亡的作用机制。该研究为传统中药复方治疗脑卒中提供了科学依据，为开发新型神经保护策略奠定理论基础。

　　

缺血性脑卒中作为全球致残致死的主要病因之一，其治疗面临严峻挑战。尽管溶栓和取栓技术能恢复血流，但随之而来的脑缺血再灌注损伤(CIRI)往往导致二次伤害，成为影响预后的关键因素。这种损伤涉及复杂的病理机制，包括氧化应激风暴、炎症级联反应和神经元凋亡等。传统中药苏合香丸在临床应用中展现神经保护潜力，但其多组分、多靶点的作用特点使得机制阐释成为难题。

河南中医药大学的研究团队在《Brain Research Bulletin》发表的研究中，创新性地发现微小RNA miR-24-3p在CIRI中扮演核心调控角色。通过构建t/MCAO动物模型和OGD/R细胞模型，研究人员采用双荧光素酶报告基因检测、Western blot等技术，系统揭示了苏合香丸通过"miR-24-3p-Keap1/Nrf2-HO-1"信号轴发挥神经保护作用的分子机制。

主要技术方法包括：1) 原代皮层神经元OGD/R模型模拟缺血再灌注损伤；2) miR-24-3p模拟物/抑制剂转染进行功能获得与缺失实验；3) t/MCAO手术构建小鼠脑缺血模型；4) TTC染色定量脑梗死体积；5) 双荧光素酶报告系统验证miR-24-3p与Keap1的靶向关系。

【研究结果】
3.1节显示：在t/MCAO小鼠脑组织和OGD/R神经元中，miR-24-3p表达显著下调，伴随炎症因子IL-6、IL-1β升高和抗凋亡因子Bcl2降低。

3.2节证实：miR-24-3p模拟物可提高神经元存活率(CCK-8检测)，抑制NF-κB信号通路激活，降低C-Caspase3表达；而抑制剂则加剧损伤。

3.3节阐明：双荧光素酶实验验证miR-24-3p直接靶向Keap1的3'-UTR区，调控下游Nrf2核转位和HO-1表达。

3.4节突破：苏合香丸血清可上调miR-24-3p表达，该效应被miR-24-3p抑制剂逆转，证实ShxP通过该通路发挥保护作用。

讨论部分强调，该研究首次将中药复方、miRNA调控和Keap1/Nrf2抗氧化通路三者有机结合：1) 发现miR-24-3p在CIRI中的新功能；2) 阐明苏合香丸"成分-靶点-通路"的精确作用机制；3) 为临床联合用药提供理论依据。值得注意的是，Keap1/Nrf2作为氧化应激调控的核心枢纽，其激活不仅能减轻脂质过氧化损伤，还可通过抑制NF-κB间接调控神经炎症，呈现"一石多鸟"的干预效果。

该研究的局限在于尚未解析苏合香丸15种组分中何种成分主导miR-24-3p调控，且对星形胶质细胞、小胶质细胞等非神经元细胞的作用有待验证。未来研究可结合网络药理学和组分敲除策略，进一步揭示复方中药的系统调控网络。这些发现不仅为缺血性脑卒中的治疗提供新靶点，也为传统中药的现代化研究树立了范式。