IL-8 mRNA与蛋白通过核蛋白及14-3-3γ正反调控PRRSV复制的分子机制与治疗潜力

本研究揭示了猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染中IL-8的双重调控机制：其mRNA通过病毒核衣壳蛋白（N）依赖核定位信号（NLS）促进复制，而IL-8蛋白则与宿主蛋白14-3-3γ竞争性结合N蛋白抑制病毒复制，为靶向IL-8的抗PRRSV治疗提供新策略。

　　

14-3-3γ的抗病毒作用
研究发现宿主蛋白14-3-3γ通过下调IL-8 mRNA显著抑制PRRSV复制。在MARC-145细胞、猪肺泡巨噬细胞（PAMs）和PK15^CD163细胞中，敲低14-3-3γ可提升高致病性PRRSV毒株TA-12的基因组复制、蛋白表达及病毒滴度，而过表达则呈现相反效果。机制上，14-3-3γ通过抑制IL-8转录发挥抗病毒作用，但其对IL-8蛋白水平无直接影响。

IL-8的双重角色
IL-8 mRNA与蛋白对PRRSV复制呈现截然相反的作用：

1. 促病毒阶段：IL-8 mRNA水平与病毒复制正相关。通过突变IL-8起始密码子（ATG→TGA/GCA）证实，其促病毒效应独立于蛋白翻译功能，可能与RNA结构或宿主因子互作相关。
2. 抗病毒阶段：IL-8蛋白显著抑制PRRSV复制。体外表达的IL-8蛋白可降低TA-12、CH-1R等多毒株的病毒载量，且抑制作用呈剂量依赖性。

N蛋白的转录调控
PRRSV核衣壳蛋白（N）通过其NLS域（aa11-13，尤其是K10/K12）上调IL-8转录。NADC30-like毒株因N蛋白12R突变丧失该功能，与其临床温和表型可能相关。激光共聚焦显示N蛋白核定位是其激活IL-8转录的前提条件。

竞争性互作网络
14-3-3γ与IL-8蛋白竞争性结合N蛋白：

• 14-3-3γ过表达减少N蛋白核分布，抑制IL-8转录；
• IL-8蛋白通过结合N蛋白阻断其核转位，形成负反馈调节。
  免疫共沉淀与共定位实验证实三者形成动态互作枢纽。

治疗潜力与展望
研究首次揭示IL-8在PRRSV感染中的"双刃剑"特性：早期mRNA促病毒与晚期蛋白抗病毒的时空调控为开发新型抗PRRSV药物（如IL-8蛋白制剂或NLS靶向抑制剂）提供理论依据。14-3-3γ作为天然抗病毒因子的发现，亦为宿主导向疗法开辟新思路。