基于吖啶橙(AO)染色技术的糠虾模型细胞毒性快速评估方法优化研究

为解决水生无脊椎动物细胞毒性评估缺乏标准化方法的问题，研究人员开发了针对糠虾模型的优化吖啶橙(AO)染色技术。通过测试有机毒物(tralopyril)和无机毒物(镉)暴露后的荧光响应，建立可定量检测溶酶体膜稳定性与细胞死亡的方案，为小型甲壳类生物毒性研究提供新工具。

　　

吖啶橙(Acridine orange, AO)作为一种膜渗透性荧光染料，能特异性区分细胞内的DNA、核RNA与酸性细胞器——DNA和核RNA呈现绿色荧光，而溶酶体(lysosomes)及内吞体(endosomes)等酸性区室则显示红色荧光。这种独特的双色标记特性使其成为评估细胞活力、溶酶体膜完整性以及肿瘤检测的重要工具，但在水生无脊椎动物领域的应用尚未形成标准化方案。

本研究针对小型甲壳类动物模型——糠虾，开发了优化的AO染色技术体系。通过系统测试有机污染物(tralopyril)和重金属(镉)两类典型毒物的暴露实验，确立了最佳AO工作浓度。实验结果显示，通过定量检测绿色与红色荧光强度变化，可灵敏捕捉到毒物诱导的溶酶体膜去稳定化(lysosomal membrane destabilization)和细胞死亡等关键毒性反应。

该技术突破实现了对小型甲壳类生物细胞损伤的快速可视化诊断与定量分析，所建立的方法学框架可拓展应用于其他水生无脊椎动物的毒性评估研究，为环境毒理学监测提供了新的技术路径。