慢病毒转导过程中肿瘤细胞骨架基因(ACTB/TUBB3)表达下调及其对肿瘤特性的影响

研究人员通过慢病毒转导技术构建了稳定表达TagRFP荧光蛋白的Hep2喉腺癌细胞系，并分离获得2B10和2F11两个亚克隆。研究发现高拷贝TagRFP转基因可显著下调细胞骨架基因(ACTB/TUBB3)表达，降低细胞增殖活性，改变线粒体氧化还原酶活性，并在裸鼠模型中显示肿瘤形成能力减弱。该研究揭示了外源基因插入对"看家基因"表达的影响机制，为肿瘤模型构建提供了重要参考。

　　

为实时观测细胞生命活动，科学家常将荧光蛋白基因（如TagRFP）整合至基因组。然而这种基因操作可能引发细胞表型-基因型的显著改变，尤其在肿瘤研究中，亚克隆筛选过程可能伴随人工致癌转化风险。

研究团队采用慢病毒转导技术构建了组成型表达TagRFP的Hep2喉腺癌细胞系（Hep2-TagRFP），从中分离出2B10和2F11两个稳定表达株。通过MTT实验、流式细胞周期分析、实时定量PCR（qPCR）和裸鼠异种移植等实验发现：高拷贝TagRFP转基因会干扰β-肌动蛋白（ACTB）和Ⅲ型β-微管蛋白（TUBB3）等关键细胞骨架基因表达，导致细胞增殖能力下降，线粒体氧化还原酶活性改变。更令人惊讶的是，这些基因修饰的亚克隆在裸鼠体内的成瘤能力明显减弱。

该研究首次揭示慢病毒载体随机插入可能影响"看家基因"（housekeeping genes）表达，这种"位置效应"会导致转导细胞出现代谢异常、增殖受限和致瘤性降低等系列表型改变。这些发现为肿瘤荧光标记模型的构建提供了重要警示——外源基因的高表达可能意外改写细胞"生命蓝图"。