5-甲基胞嘧啶调控的CCNL2通过YBX1/m5C通路促进卵巢癌发生及顺铂耐药机制研究

本研究针对卵巢癌(OC)化疗耐药难题，揭示了CCNL2通过YBX1介导的m5C甲基化调控机制促进肿瘤增殖和顺铂耐药。研究人员通过虚拟筛选发现新型YBX1抑制剂YB-B1，在体外和PDX模型中证实其可显著增强化疗敏感性。该研究为克服OC耐药提供了新靶点和治疗策略，具有重要临床转化价值。

　　

卵巢癌作为致死率最高的妇科恶性肿瘤，其治疗面临的最大挑战是化疗耐药。尽管手术联合铂类化疗是标准治疗方案，但约70%患者最终会发展为铂耐药，导致生存期急剧缩短至12-14个月。这种严峻的临床现状亟需深入探索耐药机制并开发新型干预策略。山东大学齐鲁医院妇产科的研究团队在《Journal of Ovarian Research》发表的重要研究，首次揭示了细胞周期蛋白L2(CCNL2)通过5-甲基胞嘧啶(m5C)依赖的调控机制促进卵巢癌发生发展及顺铂耐药的全新通路，并创新性地通过虚拟筛选发现靶向该通路的小分子抑制剂YB-B1，为逆转化疗耐药提供了突破性解决方案。

研究主要采用组织微阵列分析、RNA-蛋白质互作检测（包括RNA pull-down和RIP）、m5C甲基化检测（MeRIP）、药物虚拟筛选及PDX模型验证等技术方法。研究团队收集了130例卵巢癌和50例正常输卵管组织样本构建组织芯片，通过生物信息学分析和实验验证相结合的系统研究策略。

CCNL2在卵巢癌中高表达且预示不良预后
通过分析GSE69428数据集和CPTAC数据库，发现CCNL2在卵巢癌组织中的mRNA和蛋白水平均显著升高（图1A-C）。临床样本验证显示，CCNL2高表达与肿瘤分级正相关（图1D），且与患者较差的无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）显著相关（图1I-L）。

CCNL2促进卵巢癌细胞增殖和化疗耐药
功能实验证实，CCNL2敲除可抑制HEY和OV90细胞的增殖、迁移和侵袭能力（图2B-F），而过表达则促进肿瘤生长（图2J-L）。更重要的是，CCNL2敲除使顺铂IC₅₀值降低42%，显著增强细胞凋亡（图3A-B），在PDX模型中也观察到肿瘤生长抑制和Ki-67表达下降（图3D-G）。

YBX1通过m5C修饰调控CCNL2稳定性
机制研究发现YBX1作为m5C"阅读器"，直接结合CCNL2 mRNA的3'UTR区域（图4G-H），其关键色氨酸位点W65突变会削弱这种调控作用（图4K）。MeRIP实验证实YBX1维持CCNL2 mRNA的m5C修饰水平（图4I），而MATR3作为协同因子与YBX1形成复合物共同稳定CCNL2转录本（图5A-F）。

虚拟筛选发现YB-B1增强化疗敏感性
基于YBX1蛋白结构筛选获得的抑制剂YB-B1（KD=5.67μM）（图6C-D）可时间依赖性下调CCNL2/YBX1表达（图6E-F）。体外实验显示YB-B1与顺铂联用使细胞存活率降低60%（图6I），PDX模型证实联合治疗组肿瘤体积缩小更显著（图6L-M）。

这项研究首次阐明CCNL2/YBX1/m5C轴在卵巢癌化疗耐药中的核心作用，创新点在于：1）发现CCNL2作为新型耐药标志物；2）揭示YBX1-MATR3复合物通过m5C表观调控维持CCNL2稳定的分子机制；3）开发出首个靶向该通路的小分子抑制剂。研究不仅为理解卵巢癌耐药提供了新视角，更通过PDX模型验证了转化医学价值，为临床联合用药方案的优化奠定了理论基础。未来需要进一步探索YB-B1的毒理学特性，并开展更大规模的临床前评估以推动其临床应用。