ETS2通过TLR4/NF-κB通路调控M1型巨噬细胞极化促进溃疡性结肠炎炎症反应的机制研究

本研究针对溃疡性结肠炎(UC)中巨噬细胞极化失衡的关键问题，由浙江中医药大学附属杭州中医院消化科团队揭示了转录因子ETS2通过激活TLR4/NF-κB信号通路促进M1型巨噬细胞极化的分子机制。研究人员通过DSS诱导的小鼠UC模型和LPS/IFN-γ刺激的RAW264.7细胞模型，结合shRNA基因沉默技术，发现ETS2缺失可显著抑制M1型标志物(CD86/iNOS)表达及促炎因子(TNF-α/IL-1β)释放，并通过TLR4激动剂RS09验证了通路特异性。该研究为UC的靶向治疗提供了新策略，发表于《European Journal of Medical Research》。

　　

溃疡性结肠炎(UC)作为一种慢性肠道炎症性疾病，全球患者已超500万，且20年后癌变风险较常人升高1.7倍。尽管生物制剂的应用改善了临床预后，但仍有10-20%患者最终需接受结肠切除术。近年研究发现，肠道巨噬细胞的M1/M2极化失衡是推动UC进展的关键环节，其中M1型巨噬细胞过度活化导致的促炎因子风暴尤为突出。然而，调控这一过程的核心分子机制尚未完全阐明。

浙江中医药大学附属杭州中医院消化科刘彬彬、余建顺等研究人员在《European Journal of Medical Research》发表的重要成果，首次揭示了ETS2转录因子通过TLR4/NF-κB信号轴驱动M1型巨噬细胞极化进而加剧UC炎症的分子机制。这项研究不仅为理解UC发病提供了新视角，更为开发靶向ETS2的精准治疗策略奠定了理论基础。

研究团队采用多维度技术路线：建立DSS诱导的小鼠急性UC模型评估结肠病理变化；通过LPS/IFN-γ刺激RAW264.7巨噬细胞构建体外炎症模型；采用shRNA慢病毒载体实现ETS2基因沉默；运用流式细胞术检测iNOS⁺/F4/80⁺亚群；结合Western blot和免疫荧光分析关键蛋白表达；使用TLR4特异性激动剂RS09进行通路挽救实验。

研究结果部分显示：
ETS2在UC小鼠中上调并与巨噬细胞共定位
DSS模型组小鼠结肠长度显著缩短(P<0.01)，ETS2 mRNA和蛋白表达量较对照组增加2.3倍和1.8倍。免疫荧光证实ETS2与巨噬细胞标志物F4/80存在明显共定位。

ETS2促进M1型极化并激活TLR4/NF-κB通路
LPS/IFN-γ刺激使RAW264.7细胞中ETS2表达升高1.5倍，同时iNOS⁺/F4/80⁺亚群比例从5.2%增至22.9%(P<0.01)。Western blot显示TLR4、p-p65/p65和p-IκBα/IκBα蛋白水平同步上调。

ETS2缺失抑制炎症反应
sh-ETS2转染使M1标志物CD86和iNOS蛋白表达降低63%和57%(P<0.01)，促炎因子TNF-α和IL-1β分泌量减少68%和72%。流式检测显示iNOS⁺/F4/80⁺亚群比例回落至9.8%。

TLR4激动剂逆转ETS2沉默效应
添加RS09后，sh-ETS2组的TLR4通路蛋白恢复至模型组85%水平，M1型极化比例回升至18.6%，证实ETS2通过TLR4/NF-κB发挥调控作用。

体内实验验证治疗潜力
ETS2沉默使UC小鼠结肠长度增加1.3倍，HE染色显示隐窝结构修复，促炎因子水平下降约60%。免疫荧光证实结肠组织中ETS2与iNOS共定位强度减弱。

该研究创新性地确立了ETS2-TLR4/NF-κB-M1极化轴在UC发病中的核心地位。讨论部分指出，ETS2作为巨噬细胞炎症反应的核心调控因子，其过表达可能通过增强TLR4启动子活性导致NF-κB信号持续激活。这一发现为开发靶向ETS2的小分子抑制剂提供了理论依据，同时提示监测巨噬细胞极化状态可能成为评估UC预后的新型生物标志物。研究局限性在于未解析ETS2与TLR4启动子的直接结合机制，且慢性UC模型中的验证有待开展。这些突破性成果不仅深化了对UC免疫微环境的认识，更为实现UC的精准免疫调节治疗开辟了新途径。