病毒诱导桥本甲状腺炎相关生物标志物：整合生物信息学与机器学习的创新研究

为解决乳糜泻(CD)诊断中血清学与组织学不一致的难题，荷兰阿姆斯特丹大学医学中心团队开发了基于Dextramer技术检测麦胶蛋白特异性T细胞(α1-/α2-gliadin-Dm)的新方法。研究发现CD患者外周血中CD4+TEM细胞频率显著高于健康对照(HC)和非乳糜泻谷蛋白敏感(NCGS)患者(p≤0.0001)，短期低剂量谷蛋白激发(5g/d)即可使86%患者产生阳性反应。该技术为血清阴性CD等疑难病例提供了新型无创诊断方案。

　　

在乳糜泻诊断领域，血清学检测与小肠组织病理学的不一致性长期困扰着临床医生。约2-6.5%的血清阴性乳糜泻(SnCD)患者因缺乏组织转谷氨酰胺酶抗体(tTG-IgA)而漏诊，而自我实施无麸质饮食(GFD)的人群更使诊断复杂化。传统的高剂量(30g/d)谷蛋白激发试验需要6周，患者依从性差且准确性有限。面对这些挑战，阿姆斯特丹大学医学中心(Amsterdam University Medical Centers)的研究团队开创性地将Dextramer(Dm)技术应用于麦胶蛋白特异性T细胞检测，相关成果发表在《Journal of Translational Autoimmunity》。

研究采用流式细胞术结合HLA-DQ2.5限制性α1-/α2-麦胶蛋白肽标记的Dextramer，对健康对照(HC)、非乳糜泻谷蛋白敏感(NCGS)、活动性乳糜泻(aCD)和GFD患者进行检测。通过随机双剂量谷蛋白激发试验(5g/15g每日)评估敏感性，并分析CD38表达作为激活标志物。

性能验证
α1-/α2-Dm能特异性识别相应T细胞克隆，在T_EM(CD45RA^-CD62L^-)群体中信号最强。ROC曲线显示α1-Dm:CLIP-Dm比值诊断AUC达0.90，cut-off值2.2时特异性100%。

诊断特征
aCD和GFD患者α1-Dm阳性率76%(16/21)，α2-Dm达88%(15/17)。值得注意的是，GFD≥5年患者基线阳性率仅50%，但经1周谷蛋白激发后6/8例转阳，4周内全部患者均产生应答。

CD38动态变化
aCD患者CD38⁺麦胶蛋白特异性T细胞比例显著高于GFD组(p<0.008)。激发试验中，CD38表达1周内即显著上调，而其他T_EM无此变化，证实其激活特异性。

真实世界验证
16例疑难病例(含4例SnCD)检测显示，所有临床确诊CD患者(含3例潜在CD)均检出麦胶蛋白特异性T细胞，而NCGS患者3/4阴性，1例临界值。

这项研究突破性地证明：商业化的Dextramer技术可在专科实验室实现麦胶蛋白特异性T细胞检测；短期低剂量(5g/d)谷蛋白激发能显著提升敏感性；CD38表达动态监测可辅助判断免疫激活状态。相比传统方法，该方案将诊断周期从6周缩短至1周，且剂量降低83%，为SnCD、潜在CD等疑难病例提供了变革性诊断工具。未来需扩大HLA分型覆盖(DQ8/DQ2.2)并纳入γ/ω-麦胶蛋白肽以进一步提升敏感性。