儿童急性白血病融合基因新抗原的内源性T细胞应答：免疫治疗新策略

本研究针对融合基因驱动的儿童急性白血病预后差、缺乏有效疗法的问题，通过快速扩增患者骨髓来源的T细胞，首次系统证实了33/34例患者存在白血病反应性T细胞，并鉴定出靶向KMT2A::AFF1等融合新抗原的特异性TCR。该研究为开发基于自体T细胞过继疗法和融合新抗原疫苗提供了关键依据，发表于《Leukemia》。

　　

在儿童血液肿瘤领域，融合基因驱动的急性白血病始终是临床治疗的难点。尽管化疗方案不断优化，携带KMT2A重排等特定融合基因的患者5年无事件生存率仍不足30%。这类白血病具有突变负荷低、免疫原性弱的特点，使得CAR-T等现有免疫疗法难以奏效。更棘手的是，传统治疗可能清除白血病原始细胞的同时，也耗竭了本可识别肿瘤的T细胞克隆。

圣犹达儿童研究医院(St. Jude Children's Research Hospital)的研究团队另辟蹊径，将目光投向患者骨髓微环境中潜伏的T细胞。通过创新的快速扩增协议(REP)，研究人员从34例初诊/复发患者的骨髓样本中成功扩增T细胞（中位扩增倍数907-1027倍），并建立了一套多维度评估体系：通过4-1BB/OX40激活标记上调和IFN-γ分泌检测T细胞反应性，结合细胞毒性实验验证功能，再通过单细胞TCR测序锁定特异性克隆。

研究首先揭示了一个突破性现象：97%（33/34）的样本存在白血病反应性T细胞，包括15例ALL、15例AML和3例MPAL患者。值得注意的是，AML和MPAL样本需要IFN-γ预处理以提升MHC表达（MHC I/II分别上调1.4倍和2.4倍），而ALL样本则展现出更强的本底反应性。通过PD1^hiCD39⁺标记分选，研究者将肿瘤反应性T细胞富集了2.5倍，这类细胞同时高表达耗竭标记TIM3，暗示了免疫检查点抑制剂的潜在价值。

+和PD1⁺ T细胞亚群对白血病原始细胞的反应性'>

研究最关键的发现是从KMT2A::AFF1融合的婴儿ALL样本中分离出能特异性识别融合新抗原的TCR克隆。例如TCR SJINF002_2能识别DPA1 * 02:01/DPB1 * 01:01呈递的KMT2A外显子10-AFF1外显子4融合肽段，在体内实验中该TCR显著降低小鼠白血病负荷（p<0.01），延长生存期。类似的，TCR SJAML030459_5被证实通过HLA B*51:01识别PICALM::MLLT10融合表位。这些克隆仅在诊断/复发时被检测到（频率0.001%-0.0062%），治疗后完全消失，解释了为何常规治疗难以诱导持续免疫应答。

这项研究颠覆了对儿童白血病"免疫冷肿瘤"的传统认知，证实了融合基因可产生免疫原性新抗原。其临床意义在于：①为过继性T细胞疗法提供了现成的靶点，通过冻存诊断期T细胞可制备个体化治疗方案；②设计的融合新抗原疫苗可能预防复发；③PD1^hiCD39⁺TIM3⁺标记组合为筛选功能性T细胞提供了新标准。未来研究需扩大样本验证更多融合类型（如NUP98::NSD1、RUNX1::RUNX1T1），并探索与免疫检查点抑制剂的联合策略。

（注：全文数据来自患者骨髓样本和PDX模型，技术细节包含REP扩增、ELISPOT、流式细胞术、单细胞TCR测序和CRISPR-TRAC基因编辑等，具体参见原文方法部分）