HexaBody-CD27（GEN1053/BNT313）：一种通过Fc沉默和六聚化增强的新型CD27激动抗体可独立于FcyR+细胞激活T细胞功能并与PD-1阻断协同增效

本研究针对传统CD27激动抗体依赖FcyR+细胞交叉连接的局限性，通过HexaBody平台开发了具有Fc沉默(P329R)和六聚化增强(E345R)突变的新型抗体HexaBody-CD27。该抗体能独立于FcyR+细胞诱导CD27受体簇集，显著增强T细胞增殖、细胞毒性及细胞因子分泌，且不引起T细胞耗竭。与PD-1阻断联用可协同增强抗肿瘤免疫应答，为肿瘤免疫治疗提供新策略。

　　

在肿瘤免疫治疗领域，PD-1/PD-L1等免疫检查点抑制剂虽取得突破，但仅对部分患者有效且易产生耐药性。CD27作为TNF受体(TNFR)超家族成员，其与配体CD70结合可促进T细胞活化，但传统CD27激动抗体需依赖FcyR+细胞介导的交叉连接，且可能通过Fc效应功能耗竭CD27⁺ T细胞。Genmab B.V.（荷兰）与BioNTech SE（德国）的研究团队通过HexaBody技术平台，开发了兼具Fc沉默(P329R)和六聚化增强(E345R)突变的新型CD27抗体HexaBody-CD27(GEN1053/BNT313)，相关成果发表于《Scientific Reports》。

研究采用BRET（生物发光共振能量转移）技术证实HexaBody-CD27可自发形成细胞表面簇；通过CD27报告基因实验显示其激动活性不依赖FcyRIIb⁺细胞或补体C1q；利用原代T细胞实验（包括多克隆激活和抗原特异性模型）评估功能；通过NSCLC患者肿瘤组织培养分析TIL扩增能力。

HexaBody-CD27的分子设计与表征
通过OmniRat?免疫获得CD27抗体后，引入E345R突变使抗体结合CD27后通过Fc-Fc相互作用形成六聚体，同时P329R突变消除FcyR和C1q结合能力。与携带E430G突变的变体不同，E345R变体在不依赖C1q条件下仍保持活性（图1b）。ADCP实验证实HexaBody-CD27不会诱导巨噬细胞吞噬T细胞（图2a），而野生型IgG1-CD27会导致T细胞耗竭。

FcyR非依赖的CD27激动机制
BRET分析显示HexaBody-CD27在细胞表面形成紧密簇集（间距<10 nm），而野生型抗体无此特性（图2c）。在缺乏FcyRIIb⁺细胞时，HexaBody-CD27仍能激活CD27信号，而传统抗体需高比例(2:1)的FcyRIIb⁺细胞（图2d）。

T细胞功能增强
在CD3刺激的PBMC中，HexaBody-CD27显著促进CD8⁺ T细胞增殖（图3a），并推动初始T细胞向中央记忆(CM)表型分化（图3b）。在抗原特异性模型中，该抗体增强CLDN6-TCR⁺ CD8⁺ T细胞对表达PD-L1的肿瘤细胞的杀伤（图3e-f），且与PD-1阻断联用可协同提升IFN-γ和GM-CSF分泌（图5a）。

临床前转化潜力
在5例NSCLC患者的离体肿瘤培养中，HexaBody-CD27使其中2例的CD8⁺ TIL扩增≥20倍（图4b），提示其对肿瘤微环境中预存抗原特异性T细胞的激活潜力。

该研究首次证明通过理性设计可实现FcyR非依赖的CD27靶向治疗，克服了传统抗体依赖微环境辅助细胞的限制。HexaBody-CD27与PD-1阻断的协同效应为联合免疫治疗提供新思路，其Fc沉默特性避免T细胞耗竭，显著提升安全性。目前该抗体已进入临床评估（NCT05435339），有望为实体瘤治疗开辟新路径。