安第斯药用植物柔毛山蚂蝗(D. molliculum)的DNA条形码与HPLC指纹图谱研究：物种鉴别及药理潜力评估

这篇研究通过DNA条形码(trnH-psbA/matK/ITS1)和高效液相色谱(HPLC)指纹图谱技术，首次建立了安第斯地区特有药用植物柔毛山蚂蝗(D. molliculum)与近似种D. adscendens的鉴别体系，并发现其抗氧化活性(RACI指数)显著高于后者，其中芹菜素-8-C-葡萄糖苷(vitexin)、单宁酸和绿原酸被鉴定为关键活性成分。

　　

研究背景与意义

安第斯山脉特有的柔毛山蚂蝗(Desmodium molliculum)与广布种D. adscendens在厄瓜多尔传统医学中被混用，用于治疗炎症、伤口愈合和肝脏疾病等。尽管D. adscendens已有较充分研究，但D. molliculum缺乏系统的遗传和化学特征数据。这两种植物形态相似且共享"hierba del infante"等俗名，但生长海拔差异显著（D. molliculum:1500-3500 m.a.s.l.；D. adscendens:0-2000 m.a.s.l.），提示其代谢产物可能存在重要差异。

材料与方法

研究团队在厄瓜多尔阿苏艾和埃尔奥罗省不同海拔区域采集样本，通过CTAB法提取DNA，首次获得D. molliculum的trnH-psbA、matK、ITS1等5种DNA条形码序列。采用甲醇渗漉法制备提取物，通过Folin-Ciocalteu法、DPPH/ABTS/FRAP等4种体外抗氧化评价体系建立相对抗氧化能力指数(RACI)。HPLC指纹图谱采用C18柱(250×4 mm)，以0.1%乙酸水溶液-乙腈梯度洗脱，检测波长280/330 nm，结合偏最小二乘(PLS)和正交偏最小二乘(OPLS)模型分析活性成分。

关键发现

遗传鉴别方面：
• 系统发育分析显示trnH-psbA（支持率91%）、matK（79%）和ITS1（93%）能有效区分两物种，而rbcL区分度最低（支持率<61%）
• D. molliculum的DNA条形码为首次报道，NCBI数据库中原无该物种序列记录

抗氧化活性方面：
• D. molliculum提取物的DER_NATIVE为7.6:1，显著高于D. adscendens(8.2:1)
• 基于主成分分析改进的RACI-PCA指数显示，D. molliculum抗氧化能力在所有检测方法中均显著更高(p<0.001)

活性成分鉴定：
• HPLC指纹图谱结合PLS/OPLS模型在280nm处鉴定出单宁酸和绿原酸为D. molliculum特有成分
• 330nm色谱显示D. molliculum中芹菜素-8-C-葡萄糖苷(vitexin)含量显著高于D. adscendens
• 这些成分与FRAP(载荷0.53)、ABTS(0.49)等抗氧化指标高度相关

研究价值与应用

该研究首次建立了一套整合遗传和化学指纹的D. molliculum鉴别体系，解决了传统分类学难题。发现的特定黄酮类成分和酚酸为其传统药用价值提供了科学依据，特别是更高的抗氧化活性支持其在炎症相关疾病治疗中的潜在优势。研究方法中创新的RACI-PCA指数和色谱-活性建模策略，为其他药用植物的质量评价提供了新思路。

未来方向

需通过质谱进一步确认其他活性成分，并开展体内实验验证其药理机制。该研究为安第斯地区传统药用植物的标准化利用奠定了重要基础。