生熟肉苁蓉苷对肾阳虚模型大鼠HPT轴及肠道菌群的调控作用与机制研究

本研究通过16S rRNA测序与粪便代谢组学技术，系统探讨了生/制肉苁蓉总苷（CDG）对肾阳虚（KYD）大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴（HPT）及肠道微生态的调控机制。研究发现CDG通过调节维生素B6代谢、花生四烯酸通路及关键菌群（如双歧杆菌、乳酸杆菌），显著改善甲状腺激素（T3/T4）、能量代谢指标（cAMP/cGMP、Na+-K+-ATPase）及肠道菌群失衡，为中药"药食同源"机制提供了科学依据。

　　

引言

肾阳虚（KYD）作为中医经典证候，以代谢减缓、畏寒肢冷为特征，与现代医学中的甲状腺功能减退存在病理关联。本研究聚焦传统中药肉苁蓉（Cistanche deserticola, CD）的生品与酒制品总苷（CDG），通过建立丙硫氧嘧啶诱导的KYD大鼠模型，首次系统揭示了生熟肉苁蓉苷通过HPT轴-肠道菌群-代谢网络多维调控的作用机制。

材料与方法

实验采用SPF级SD大鼠，通过丙硫氧嘧啶灌胃15天建立KYD模型，分别给予生品肉苁蓉总苷（RG，82 mg/kg）和酒制品肉苁蓉总苷（WG，50 mg/kg）干预。采用HPLC分析CDG主要成分（松果菊苷、毛蕊花糖苷等），通过ELISA检测血清甲状腺激素（T₃、T₄、TSH、TRH）、能量代谢指标（cAMP/cGMP、Ca²⁺-ATPase）及肝脏糖原含量。结合甲状腺组织H&E染色、免疫组化（TPO、TG、TSHR蛋白表达）及qPCR技术，评估HPT轴功能。采用UPLC-MS/MS非靶向代谢组学分析粪便代谢物，Illumina MiSeq平台进行16S rRNA测序，通过LEfSe分析差异菌群。

结果

HPT轴调控：KYD模型组出现典型甲状腺滤泡萎缩（组织学评分降低35%），TSHR蛋白表达下降42%。WG组显著提升T₃水平达正常组1.8倍（P<0.01），且较RG组多调节9种代谢物。

代谢重编程：发现98个差异代谢物，关键涉及维生素B6代谢（如吡哆胺上调2.1倍）和花生四烯酸通路。WG特异性调控磷脂酰胆碱（PC）和磷脂酰乙醇胺（PE），其与关键菌属（如链球菌）呈显著负相关（r=-0.72）。

菌群重塑：模型组Firmicutes/Bacteroidetes比值降低57%，WG组恢复至近正常水平。生品RG主要提升双歧杆菌（Bifidobacterium）丰度3.2倍，而酒制WG额外增加普雷沃菌（Prevotella）与叶酸代谢关联性（P<0.05）。

讨论

研究创新性揭示CDG通过"菌群-代谢-HPT轴"三重机制改善KYD：

1. 维生素B6枢纽：吡哆胺作为关键节点，与乳酸杆菌（Lactobacillus）丰度呈强正相关（r=0.81），直接参与T₄合成；
2. 磷脂代谢调控：酒制工艺使WG特异性激活PC/PE循环，改善线粒体膜电位（Ca²⁺-ATPase活性提升68%）；
3. 神经内分泌免疫网络：双歧杆菌通过叶酸合成调控TRH表达，证实"肠-脑-甲状腺轴"存在物质基础。

结论

该研究首次阐明肉苁蓉酒制增效的科学内涵：酒制工艺通过转化苯乙醇苷类成分（如异毛蕊花糖苷增加4.3倍），更高效调控Firmicutes/Bacteroidetes平衡及花生四烯酸代谢。研究成果为中医"肾阳为生命之本"理论提供了现代生物学解释，并为代谢-免疫交叉研究提供了新范式。