白及多糖(BSP)的结构表征及其对淀粉消化酶的抑制活性与益生作用研究

【字体: 时间:2025年07月26日 来源:Frontiers in Nutrition 5.1

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  本文首次从传统中药白及(Bletilla striata)中分离获得平均分子量(Mw)85.4 kDa的中性多糖BSP,通过UV、FT-IR、NMR等技术解析其结构为→4)-α-D-Glcp-(1→等糖残基构成。研究发现BSP对α-淀粉酶(67.75%抑制率)和α-葡萄糖苷酶(48.24%抑制率)具有竞争性抑制(Ki分别为0.28和0.16 mg/mL),并能促进乳酸菌增殖(产SCFAs达386.11 μmol/L),为糖尿病管理和肠道健康提供新型天然候选物质。

  

结构特征解析
通过热水提取与柱层析纯化获得白及多糖(BSP),其总糖含量达88.35%,不含蛋白质和糖醛酸。甲基化与GC-MS分析显示其由甘露糖、葡萄糖和半乳糖(摩尔比3.2:5.4:1.0)构成,主要糖苷键包括→4)-β-D-Manp-(1→和→6)-β-D-Galp-(1→。FT-IR光谱在888 cm-1和904 cm-1的特征峰证实α/β混合构型,而13C NMR中δ 103.64 ppm信号提示→4)-β-D-Manp-(1→残基存在。原子力显微镜(AFM)显示BSP分子高度达30.9 nm,表明其通过羟基形成聚集体。

酶抑制活性
BSP对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的IC50分别为0.85和4.62 mg/mL,显著低于阿卡波糖的摩尔浓度效应。Lineweaver-Burk双倒数曲线显示两组曲线在纵轴相交,证实为竞争性抑制机制。动力学分析表明BSP与α-葡萄糖苷酶结合力更强(Ki=0.16 mg/mL),可能通过氢键阻碍底物进入酶活性中心。

益生功能验证
以BSP为唯一碳源时,植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)和嗜酸乳杆菌(L. acidophilus)的OD600值分别增长至0.8和0.6,与葡萄糖组无显著差异(p>0.05)。培养30小时后产生乙酸(122.64 μmol/L)、丙酸(88.15 μmol/L)和丁酸(175.32 μmol/L),培养基pH从6.5降至4.2。扫描电镜显示细菌形态完整,证实BSP可替代传统碳源维持益生菌活性。

应用前景
该研究首次揭示BSP通过三重作用机制:①竞争性抑制碳水化合物水解酶,②促进益生菌增殖,③增加短链脂肪酸产量,为开发抗糖尿病与调节肠道菌群的天然制剂提供理论依据。分子量(85.4 kDa)与低免疫原性特征使其在功能食品和药物递送系统具应用潜力,后续需开展动物实验验证体内功效。

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